革蘭氏染色法需要準(zhǔn)備的藥品與器材？以及步驟？
信息分類:金相實(shí)驗(yàn)儀器專題-技術(shù)應(yīng)用
作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2012-4-8 23:42:12
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藥品與器材
藥品
1. 95%酒精
2.蒸餾水
3.長(zhǎng)有Top10 E. coli之液態(tài)培養(yǎng)菌液
4. LB agar plates：1% (w/v) Bacto-tryptone, 0.5% Bacto yeast extract, 1%
NaCl，調(diào)至pH 7.0后，加入1.5% (w/v) Bacto agar，以濕熱法滅菌。
器材
1.接種環(huán)
2.三角玻棒
3.酒精燈
4.試管
5.試管架
6.封口蠟?zāi)?parafilm)
實(shí)驗(yàn)步驟
(一)細(xì)菌之接種方法—分區(qū)劃線法(Streaking method)
1.每一組取一個(gè)LB plate，在培養(yǎng)皿底部標(biāo)明組別及日期，并寫上菌株名
稱：如“Top10 E. coli “。
2.將接種環(huán)在酒精燈火焰上燒紅，環(huán)上方部份亦以火焰燒過，將接種環(huán)在培養(yǎng)基空白處輕戳以使冷卻。
【注意！ 蓋子請(qǐng)勿全開或置于實(shí)驗(yàn)桌上！
此時(shí)接種環(huán)請(qǐng)勿放置在桌上或接觸到其它東西！ 】
3.用右手小指及手掌心將Top10 E. coli之液態(tài)培養(yǎng)菌液試管蓋子打開
(蓋子夾在小指及手掌中)，以接種環(huán)輕觸菌液，使接種環(huán)上沾有細(xì)菌。
4.打開空白的LB plate，將沾有菌落的接種環(huán)于其上輕輕連畫數(shù)條線后，將培養(yǎng)皿蓋子蓋回。
5.再次將接種環(huán)在酒精燈火燒紅并使冷卻。 將培養(yǎng)皿旋轉(zhuǎn)約60度，畫第二次線。
6.重復(fù)上一步驟之操作，畫第三次線或第四次線。
7.將接種環(huán)在火焰上燒紅滅菌后置回實(shí)驗(yàn)桌上。
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