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正文:
細(xì)胞懸液純度分辨率-細(xì)胞的分選記錄圖像
顯微鏡
細(xì)胞懸液純度
細(xì)胞分選型流式細(xì)胞儀應(yīng)與細(xì)胞分析型區(qū)別對待。從電子學(xué)的角度
來看,雖然分選型流式細(xì)胞儀更為復(fù)雜,但其主要功能是為制備分選細(xì)
胞而設(shè)計(jì)的,因而不可在敏感性和分辨率角度方面過高要求此型儀器。
細(xì)胞分選過程中,選用的細(xì)胞懸液純度好壞會(huì)直接影響分辨率的指
標(biāo)。上述所有方法均可用于細(xì)胞分選。然而需要注意的是,可用活細(xì)胞
分選的卻只有幾項(xiàng)。這方面尚需進(jìn)一步研究探索,以求發(fā)展。細(xì)胞分選
中更應(yīng)論及的是技術(shù)局限性,首先,含分選細(xì)胞的液滴的間隔超過鞘液
中空液滴的15倍,這意味著細(xì)胞將大大地被稀釋。正常情況下需將細(xì)胞
進(jìn)一步濃縮,造成不可避免的丟失。
加快細(xì)胞分析速度將大大降低制備所得樣品的純度。廠家提供的噴
嘴流速被以為是獲取良好制備結(jié)果的最佳選擇,這一公認(rèn)流速不超過50
00個(gè)細(xì)胞/秒。一般認(rèn)為小于2000細(xì)胞/秒的流速更為有效。這一速度
適用于所有能流經(jīng)噴孔的細(xì)胞。分選細(xì)胞的實(shí)際回收率取決于待分細(xì)胞
與待除去細(xì)胞之間的比例關(guān)系,因?yàn)橛?jì)算機(jī)也一直在處理確切的細(xì)胞信
息。實(shí)際上,低頻率含細(xì)胞液滴1:15可避免上述問題。在統(tǒng)計(jì)學(xué)上降
低細(xì)胞鞘液同時(shí)包括兩個(gè)細(xì)胞的機(jī)率。
分選一種細(xì)胞使其達(dá)到所要數(shù)目,則要求分選周期加長,這無形中
增加下列潛在危險(xiǎn):細(xì)胞溶解碎片增多,細(xì)胞團(tuán)聚,異物生成而堵塞噴
嘴,甚至導(dǎo)致噴孔流速改變。而這正是造成細(xì)胞流失及純度下降的最重
要的原因。
上述方法學(xué)的所有過失都是根據(jù)我們的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)出的。流式細(xì)胞分
析技術(shù)和細(xì)胞分選技術(shù)正以它的先進(jìn)性而被越來越多的科學(xué)家所認(rèn)識(shí)。
出自http://www.bjsgyq.com/
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