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作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2011-11-14 15:09:36
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正文:
顯微鏡下紅血球計(jì)數(shù)_方法?
紅血球呢是血液中的的組成部分之一,由身體的骨髓細(xì)胞內(nèi)生成,它的存在的作用是給身體新陳代謝所必須的輸送必要的物質(zhì),像氧氣、二氧化碳、電解質(zhì)、葡萄糖和氨基酸。
紅血球的存活時(shí)間比白血球要長(zhǎng),存活時(shí)間一般在120天左右,
我們下面來教大家一下怎么計(jì)算出血液中的紅血球數(shù)量單位體積。
紅血球之計(jì)數(shù),用血球計(jì)數(shù)盤,血球計(jì)數(shù)盤有二吸管及一計(jì)算盤,血球計(jì)算盤一般皆用厚玻璃裂成。
血液稀釋:紅血球計(jì)數(shù)用之稀釋液為:
a. Hayem's fluid 其成份為:
氯化汞 Mercuric Chloride 0.5 gm.
硫酸鈉 Sodium Sulphate 5.0 gm.
氯化鈉 Sodium Chloride 1.0 gm.
蒸餾水 Distilled water 200.0 cc
b. 生理食鹽水 Physiolgical salt solution
方法: (1) 取紅血球計(jì)數(shù)器內(nèi)的吸血管 ( 採(cǎi)用球形膨大部上方有 101 刻度之吸管 ), 吸血管須清潔乾燥,吸取血液至 0.5 刻度處,吸時(shí)宜緩而勻,如吸時(shí)有氣泡入管則須重做。
(2) 用濾紙迅即擦去粘附于吸管尖端周邊部之血液,插吸管尖瑞入稀釋液,吸稀釋液入吸管,吸時(shí)輕輕旋轉(zhuǎn)吸管,并將吸管置于垂直的位置,以防大氣泡進(jìn)入球形部份。待稀釋液吸至 101 刻度處后取出吸管。
(3) 將橡皮管取下,分別以右手拇指和中指堵塞吸管二瑞,極力振盪約一分鐘。使血液和稀釋液充分溷和。
10.1. 1.2計(jì)數(shù)
紅血球稀釋液準(zhǔn)備妥善后先吹去 2~3 滴,拭乾吸管之尖端然后將吸管之尖端觸蓋玻片及計(jì)算盤中間部份之相接處,吸管內(nèi)之液體因毛細(xì)管之吸引作用而進(jìn)入蓋玻片下。進(jìn)入蓋玻片下之紅血球稀釋液不宜過多,否則蓋玻片浮起,由此計(jì)得之紅血球數(shù)即增多,若流入計(jì)算盤之紅血球稀釋液之量適宜,則幾全部位于蓋玻片下,不至遍及凹溝,且亦無氣泡,如無此種良好之結(jié)果,此步應(yīng)重作。
略待數(shù)分鐘紅血球穩(wěn)定后,以低倍數(shù)顯微鏡檢查紅血球分佈是否均勻,如分佈不勻,則須拭淨(jìng)計(jì)算盤,重行滴入紅血球稀釋液。
一切預(yù)備完畢后,以高倍顯微鏡計(jì)數(shù)紅血球,同時(shí)調(diào)節(jié)聚光鏡使光線適宜。計(jì)算盤在四角及中央各選一中格計(jì)五格 ( 每一中格有 16 格 ) 計(jì)算其紅血球的數(shù)目,記錄于簿上,五中格計(jì)算完畢后,計(jì)得 80 小格的總數(shù),又血球如恰在格線上者,則取拾規(guī)則均須一律。
10.1. 1.3.計(jì)算法:
如設(shè)此數(shù)為E時(shí),每 1㎜3 中之總數(shù) X 可由下式算出,
400
X = E × ----- ( 全部之小格 ) ÷0.1 ( 蓋玻片至計(jì)算盤之深度 ) × 200 ( 稀釋倍數(shù) )
80
。 E × 10,000
操作時(shí)除逐部注意,以防發(fā)生錯(cuò)誤外,下列各點(diǎn)亦常為計(jì)數(shù)不準(zhǔn)確的原因: (1) 進(jìn)入吸管之血液過多或過少或釋度不確。
(2) 操作過慢致使一部血液凝固。
(3) 稀釋液配置過久內(nèi)有酵母細(xì)胞與血球溷淆。
紅血球計(jì)算完畢后,吸管及計(jì)算盤須立即洗淨(jìng),吸管可按序用水,70%,80%,95% 酒精、乙醚清洗。洗時(shí)可用口吸上述液體入吸管,然后吹去,但以橡皮球或唧筒較佳,因用口時(shí)呼氣內(nèi)的水分常附著于吸管內(nèi)壁。倘吸營(yíng)內(nèi)有凝血塊附著,可用馬尾通出,然后用濃硫酸洗淨(jìng)或置吸管于盛酸液之試管內(nèi)過夜。計(jì)算盤用潔淨(jìng)之軟布沾水拭后擦乾即可。
正常禽畜的紅血球數(shù)目 ( 百萬/㎜3)
馬 6.5~9.4 豬 5.0~9.0 猴 4.8~6.2
兔 4.5~7.0 鴨 2.8 牛 5.4~9.0
水牛 5.4~7.4 犬 6.4~8.0 火雞 2..24~2.37
鵝 2.71 綿羊 8.5~13.5 貓 6.2~10
雞 2.8~4.5 山羊 12.5~22
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