標題：液體培養(yǎng)基來提取染色體DNA、RNA或酶
信息分類:站內新聞
作者:yiyi發(fā)布
時間:2018-6-29 22:23:48
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正文:
液體培養(yǎng)基來提取染色體DNA、RNA或酶
抱子懸液有多種用途：可用于接種液體培養(yǎng)基來提取質壺或染
色體DNA、RNA或酶，制備原生質體；篩選突變體，用來在雜交中
進行重組分析和質粒轉化。以20％甘油懸浮液貯藏在一20℃的孢
子，即使經多次取樣仍可存活幾年(但是也有例外，如不產孢子的
禿型突變株和某些淡青鏈霉菌的鏈霉菌素敏感菌株)。
制備孢子懸液簡單的步驟如下：從已經長好孢子的固體培養(yǎng)
物上刮取孢子，懸于水中，用棉花過濾以除去菌絲片段和固體培
養(yǎng)基碎片后，離心得到孢子沉淀。離心也可除去培養(yǎng)基中的可溶
性成份(這些成份中包括生長因子，它們會影響營養(yǎng)缺陷型標記的
選用，或包括一些可降低孢子壽命和抑制孢子萌發(fā)的“腐化。物
質)。
材料
生物材料：長有新鮮菌株的斜面或平板．
溶液、化學試劑等：無菌水，20％甘油(高壓滅菌)。
小儀器：接種環(huán)，吸管，用于過濾的裝有脫脂棉的試管(見圖
1)'離心管；旋蓋小瓶(7．5ml和20m1)。
儀器設備：混合振蕩器，臺式離心機。
試驗步驟
*1．在斜面或平板上加入9ml無菌水o
2．用接種環(huán)刮取培養(yǎng)物表面的孢子，首先輕輕地，然后逐漸
用力刮，以使孢子懸浮。
3．將此粗制的孢子懸液倒入離心管中，并在振蕩器上盡可能
地激烈振蕩1分鐘左右o
4．用裝有脫脂棉的試管過濾懸液。 ·
5．將濾液倒入離心管中，3000轉／分離心5—10分鐘以使孢
子沉淀。
·6．停止離心后，馬上倒掉上清液。
·7．將離心管在振蕩器上振蕩幾秒鐘，使孢子沉淀物分散于
殘
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科