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正文:

用倒立顯微鏡觀察原生質(zhì)體的制造

第一天---準備

1.洗手。菠菜（spinach）、喇叭花（petunia）、煙草（tobacco）或大型綠藻（Green Macroalgae）的葉子，放在水龍頭下將葉子潤濕，并拍乾。輕輕用鑷子或針刮葉子的下面。然后，切葉子約一公分平方的大小，并放入培養(yǎng)皿。取得足夠的葉片組織來覆蓋培養(yǎng)皿表面。（大型綠藻則用乾淨海水沖洗）

2.取10ml 的緩沖溶液到15ml的試管或小燒杯，加入先前量好的酵素粉末

3.到溶液內(nèi)。攪拌或蓋住離心管前后搖晃直到酵素完全溶解。

4.小心地注入10ml的酵素液到培養(yǎng)皿的底部。

5.用鑷子將懸浮在酵素液的葉子壓下使其和溶液接觸，葉子可能會稍微重迭。

6.用parafilm或膠帶封培養(yǎng)皿并放置在室溫（約25℃）一天。若有足夠的設

備，輕微地攪拌培養(yǎng)皿將是有幫助的。

7.確定事先已準備一盤的葉子在不含酵素的緩沖溶液內(nèi)。

第二天---觀察

8.輕微地攪拌并搖晃在培養(yǎng)皿的溶液（如果在顯微鏡內(nèi)沒有觀察到原生質(zhì)

體，則在間隔15~30min再觀察一次）。

9.準備一個未處理過葉子的玻片，并觀察其細胞的表面。

10.觀察原生質(zhì)體：

a.拿掉parafilm和蓋子，置培養(yǎng)皿于解剖顯微鏡約50 X【注：亦可直接用倒立顯微鏡觀察】下觀察或

b.用一個大孔徑的吸量管輕輕地吸取一些綠色的溶液并放置在顯微鏡玻片上。用蓋玻片覆蓋，以低倍光學顯微鏡下瀏覽之。
# 問題分析

1.描繪浸在不含酵素的緩沖溶液中的葉片細胞，標示所有觀察的部份并描繪細胞的外形。注意放大的倍率。

2.描繪含有酵素的溶液中的幾顆原生質(zhì)體，并形容它們的表面（注意放大的倍率）。

3.在什么情形下原生質(zhì)體和未處理的植物細胞不同？

4.原生質(zhì)體和動物細胞的比較如何？

5.準備一個玻片，放一片在含有酵素溶液的葉片，描繪并形容其邊緣。（注意放大的倍率）

6.基于你對原生質(zhì)體和葉片的觀察以及植物細胞構(gòu)成的知識，假設有關在酵素溶液內(nèi)酵素的作用。

6.為什么需要刮取并切葉片成小片？

7.為什么要溫和小心地對待原生質(zhì)體？

8.DNA可被加在經(jīng)特別處理過的細胞溶液中，在這樣的情況下細胞將會吸取（uptake）DNA。DNA轉(zhuǎn)殖的技術(shù)已常被用在細菌和酵母菌細胞之間。且不需制造原生質(zhì)體。為什么茄科在轉(zhuǎn)殖前必須先制備原生質(zhì)體。

出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科