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標(biāo)題:培養(yǎng)細(xì)胞、判斷細(xì)胞狀況、繼代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)步驟!金相顯微鏡專(zhuān)業(yè)廠(chǎng)家

信息分類(lèi):站內(nèi)新聞   作者:YIYI發(fā)布   時(shí)間:2012-3-12 17:38:31 將本頁(yè)加入收藏

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正文:

實(shí)驗(yàn)步驟:

細(xì)胞培養(yǎng)

HeLa cell in 6 cm dish

Medium : DMEM + 5% FBS + 1% Glutamine + 1% PS

繼代培養(yǎng)

將原培養(yǎng)細(xì)胞之培養(yǎng)液去除

用 1x PBS wash

加入 500 μl Trypsin/EDTA,37℃下放置 1 min

加入 3.5 ml 培養(yǎng)液,以終止 Trypsin 反應(yīng)

將細(xì)胞打散,留 1 ml 培養(yǎng)液于培養(yǎng)皿中,其馀加入試管中

培養(yǎng)皿中加入 2 ml 培養(yǎng)液,將細(xì)胞打散,均勻種回培養(yǎng)皿中

兩天后來(lái)看是否均勻、細(xì)胞數(shù)是否過(guò)多或太少

細(xì)胞計(jì)數(shù)

取 50 μl 細(xì)胞液至 eppendorf,加入 50 μl trypan blue,Pipeting mix

用血球計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)細(xì)胞











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