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正文:
了解孢子染色法之化學基本理論并練習染色法。本法為現(xiàn)行菌種分類鑒定之一。
厭氣性之梭狀芽胞桿菌屬(Clostridium)與好氣性之桿菌屬(Bacillus),在正常情形下,
為代謝作用旺盛之生長型細胞。當環(huán)境條件不利于細胞之活動時,會形成具高度抵抗力而代謝停止之孢子。
此為嚴苛環(huán)境下,確保細胞存活之轉(zhuǎn)機。在此情況下,細胞經(jīng)芽胞形成作用產(chǎn)生細胞內(nèi)構(gòu)造即內(nèi)孢子(endospore),
而內(nèi)孢子會被緻密之孢子殼(spore coat)環(huán)繞。當環(huán)境繼續(xù)惡化時,內(nèi)孢子即自衰退
之生長型細胞釋出而成獨立之孢子。孢子外層對各種不利影響如高熱、冷凍、放射線、干燥、化學藥品及染料等均具相當之抵抗力。
當環(huán)境條件變?yōu)橛欣麜r,孢子可再經(jīng)萌芽恢復為代謝旺盛之生長型細胞
原理
本法系以孔雀石綠(malachite green)為初染劑,因孢子殼不易吸收孔雀石綠,故需加熱來提高其滲透效率。
此步驟會將生長型細胞與孢子都染成綠色。之后以一般水洗來脫色。但經(jīng)孔雀石綠染色后之孢子,不易被水洗脫色。仍保留綠色。
但是孔雀石綠對生長型細胞之結(jié)構(gòu)成份不具親和力,所以水洗會移去殘留的染料
使細菌變成無色。最后再以番紅(safranin)來複染,經(jīng)脫色后之生長型細胞會變
成紅色,借此與綠色之孢子來區(qū)分
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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