乳牛瘤胃微生物多樣性分析

(一) 瘤胃液采樣所采取之瘤胃液樣品其樣品溫度約為34℃。將樣品分別保存于4℃冷藏柜與凍存于-70℃冷凍柜中，并將超低溫保存之樣品進(jìn)行冷凍乾燥后再存放于-70℃冷凍柜中。

(二) 瘤胃微生物鏡檢1.光學(xué)顯微鏡觀察。2.格蘭氏染色法。

(三) 瘤胃微生物DNA之快速萃取利用商業(yè)化套組(PowerSoil DNA Isolation Kit, MOBIO)進(jìn)行瘤胃液中微生物DNA之萃取，依照廠商所提供的操作步驟進(jìn)行萃取，最后即可得到品質(zhì)良好的較小分子量的DNA溶液

所采集之瘤胃液樣品其pH值為6.8，溫度為34℃，將樣品分別存放于4℃冷藏柜與-70℃超低溫冷凍庫(kù)中，并將存放于-70℃下之樣品冷凍乾燥，再存放于超低溫冷凍庫(kù)中，以備微生物DNA萃取之用。將瘤胃液滴于載玻片上并蓋上蓋玻片后直接于光學(xué)顯微鏡下觀察（圖1），可發(fā)現(xiàn)原蟲到處游動(dòng)，亦發(fā)現(xiàn)較小之細(xì)菌。經(jīng)由格蘭氏染色后，置于光學(xué)顯微鏡下觀察，可發(fā)現(xiàn)格蘭氏陰性和陽(yáng)性的細(xì)菌