標題：細胞培養(yǎng)試驗專業(yè)顯微鏡-金相顯微鏡廠商
信息分類:站內新聞
作者:yiyi發(fā)布
時間:2012-12-20 23:25:31
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正文:
1、細胞培養(yǎng)
將細胞培養(yǎng)基加入培養(yǎng)瓶內培養(yǎng) (細胞菌株為 RAW 264.7
細胞，使用的細胞培養(yǎng)基為 DMEM )，置于 5 %二氧化碳培養(yǎng)箱 (控制溫度 37℃)，24 小時后更換塑膠培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液。
2、種植細胞于 96 微量板孔培養(yǎng)槽 ( 96-well microplates )由 5 %二氧化碳培養(yǎng)箱中取出培養(yǎng)瓶，觀察細胞生長情
形，如達七、八分滿時即可開始種植細胞；首先除去培養(yǎng)瓶內之培養(yǎng)基，加入 PBS 溶液，沖洗死細胞，并將之汲去。
加入 4 ml 的 trypsin-EDTA 沖洗瓶壁，放入 5 %二氧化碳培養(yǎng)箱中，10 分鐘后取出，振搖瓶身使附著在瓶壁的細胞離開瓶
壁，取出此細胞液置于離心管中，另加 6 ml 的 DMEM 培養(yǎng)基后，于 3000 rpm 離心 10 分鐘。
去除上清液，加入 10 ml DMEM 后，均勻混合，取細胞混合液 20 μl 與 20 μl 的錐藍染劑 ( trypan ) 混合，于顯微鏡上觀
察細胞總數(shù)，并于血球計數(shù)盤上計數(shù)細胞。取一個無菌的 96培養(yǎng)槽，吸取適當?shù)募毎鹤⑷朊總�培養(yǎng)槽上，使每個培養(yǎng)槽
剛好是 10000 個細胞數(shù)，完成后置于 5 %二氧化碳培養(yǎng)箱中 (控制溫度 37℃)，培養(yǎng) 24 小時
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科