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正文:
怎樣更清晰的觀察細胞的內(nèi)部細微結(jié)構(gòu)
染色目的:
細胞的內(nèi)部細微結(jié)構(gòu),經(jīng)過特別的染色化學(xué)藥物作用之后,會起化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生特別顏色,
經(jīng)過染色的細胞其細胞核與細胞質(zhì)的細微結(jié)構(gòu),有更清楚的輪廓在
顯微鏡下辦認,以幫助作臨床診斷的參考。
檢驗方法原理
柏式染色法主要有四個原理:
1.固定
2.核染色
3.細胞質(zhì)染色
4.透明,這些原理是用不同的溶液來進行水化、脫水和浸潤。
核染色:
利用蘇木紫(Hematoxylin)來染核,一般有二種方法,一種是退行性染色法,用蘇木紫(Hematoxylin)來過染,
然后用稀釋過的0.5%鹽酸來把超過的染色去除,然后用水把鹽酸沖洗掉,另一種是進行性染色,只染到需要的顏色強度便停止。
酸堿平衡:利用堿性的氨水溶液(Ammonia water)來平衡前面步驟使用之鹽酸溶液之酸性。
細胞質(zhì)染色:常用的二種合成染料,第一種是Orange G (OG-6)分子量小,能很快穿透細胞質(zhì),會把角質(zhì)(keratin)染成鮮橘色,第二種是EA50,由伊紅(Eosin)和Light green所組成,伊紅染成熟的扁平細胞、核仁和纖毛,Light green染代謝性強細胞,如深層、中層鱗狀上皮細胞和柱狀上皮細胞染成綠色或藍色。
分色:利用1%醋酸溶液(Acetic Acid)及1%磷鉬酸溶液(Phosphotungstic Acid)將Orange G (OG-6)與EA50染在細胞質(zhì)之顏色區(qū)分。
固定:以95% Alcohol作固定液,至少30分鐘以上。
透明:最常用二甲苯(Xylene),目的是使細胞有透明度,因二甲苯(Xylene)無色,化學(xué)性為惰性,
折射率1.494,近似玻片1.515,與酒精和封片用的膠都相容的特性,能使顯微鏡的光源穿過染過色的細胞。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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