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標(biāo)題:分光光度計(jì)或顯微鏡測(cè)定細(xì)胞個(gè)數(shù)-生物實(shí)驗(yàn)顯微鏡

信息分類:站內(nèi)新聞   作者:yiyi發(fā)布   時(shí)間:2013-8-27 1:08:36 將本頁(yè)加入收藏

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正文:

分光光度計(jì)顯微鏡測(cè)定細(xì)胞個(gè)數(shù)-生物實(shí)驗(yàn)顯微鏡


酵母菌細(xì)胞之制備
取培養(yǎng)盤上少許細(xì)胞,將其溶于3.0 mL SD medium-His培養(yǎng)液中,置于軌道震盪器(orbital shaker)上培養(yǎng)隔夜。
取100μL菌液,加上900μL培養(yǎng)液,以分光光度計(jì)波長(zhǎng)600 nm (OD600)或顯微鏡測(cè)定,估算其細(xì)胞個(gè)數(shù)

以酵母菌的生物效應(yīng)作為環(huán)境荷爾蒙中雌性激素的偵測(cè)指標(biāo)。

試驗(yàn)將以經(jīng)過(guò)基因轉(zhuǎn)殖的酵母菌PL3作
為雌性效應(yīng)的生物測(cè)試指標(biāo),以人造雌性荷爾蒙作為試驗(yàn)的參考物質(zhì),并以分光光度計(jì)與顯微鏡計(jì)數(shù)細(xì)做比較,
細(xì)胞濃度過(guò)高均需經(jīng)過(guò)稀釋而后上機(jī)分析;顯微鏡計(jì)數(shù)費(fèi)時(shí),分光光度計(jì)于細(xì)胞濃度過(guò)低偵測(cè)不到,

但較為迅速,推估數(shù)目與顯微鏡推估值相當(dāng)。以分光光度計(jì)分析選擇波長(zhǎng)600 nm可降低培養(yǎng)液的干擾。
初始細(xì)胞濃度過(guò)高50000或100000 cell/well,若以96孔盤培養(yǎng),因不易達(dá)混合效果,會(huì)造成細(xì)胞集結(jié)的現(xiàn)象,
造成高估的結(jié)果。人造雌性激素雌二醇與乙基雌二醇對(duì)此酵母菌增生試驗(yàn),
以乙基雌二醇效果較雌二醇佳,生長(zhǎng)速度較快。以乙基雌二醇做測(cè)試,
50 ppn即可促進(jìn)酵母菌PL3增生,反應(yīng)相當(dāng)靈敏











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