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正文:
◇注射量依賴于注射液中樣品濃度、通過針尖的速度和針尖停留在細(xì)胞內(nèi)的時間
◇在某些情況下,利用
顯微鏡載物臺控制針下靶細(xì)胞的位置,可很有效地使針尖集中
在小視野內(nèi),然后使用操作儀的垂直控制軸刺入細(xì)胞中:
◇有時估計出注射量是很重要的,通過注射一些
熒光標(biāo)記物建立了一些標(biāo)記方法這
些方法中,一個是熒光標(biāo)記物的發(fā)散強(qiáng)度是可以光
測量的(如Rhodamine-dextran)
二利用注射物的量子發(fā)生知識能估計出注射量。然而應(yīng)強(qiáng)調(diào)的是尚沒有可
靠的方法去測定細(xì)胞質(zhì)的體積.因此精確測定最后注射人細(xì)胞質(zhì)樣品的濃度足不可
能的。
◇注射速度過快能擾亂細(xì)胞質(zhì)成分,細(xì)胞裂解或細(xì)胞從底層移位。當(dāng)注射體積小于估
計的細(xì)胞體積的50%,并且注射樣品的流動速度兒乎不導(dǎo)致可見的細(xì)胞質(zhì)移位時.
注射的效果最好
◇恒定流動方法需要相當(dāng)量的樣品;
◇這種方法須露出注射和非注射樣品細(xì)胞的表面。
◇較好的練習(xí)方法是注射溶于無鈣PBS中。0.01%熒光葡聚糖(10kDa;分子探針),
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北京顯微鏡百科
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