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正文:
利用顯微鏡研究植物上細菌行為的最新進展在很大程度上要歸功于GFP的發(fā)現(xiàn)。
作為一種
熒光基因,GFP的優(yōu)點在于熒光強度明亮且相對穩(wěn)定,功基因可在大多數(shù)細
菌中表達,可作為胞內標記而不需底物。因此,不需要對樣品進行預處理而可以直接在
顯微鏡下進行觀察,
研究過程中環(huán)境對細菌細胞的破壞程度會降到最小,而采用熒光免
疫標記或電子顯微鏡技術會產生很多潛在的偽像。此外,GFP突變體能增強熒光強度,
并且可在不同可見波長激發(fā)下發(fā)射熒光,這一點為研究者研究自體熒光背景下的GFP
信號檢測問題提供了靈活多樣的研究工具。這個問題在植物組織中很常見,
因為可見激發(fā)波長區(qū)段不同而造成的植物組織發(fā)出的熒光強度也有所不同。
而雜散熒光對圖像的污染會使這一問題更加嚴重,但是通過使用共聚焦顯微鏡可使影響
程度降到最小。
因為共聚焦激光掃描顯微鏡(CISM)僅僅收染來自聚焦平面的熒光信號,并通過針孔阻
止其他散射光.所以,共聚焦激光掃描顯微鏡能大大改善植物上的熒光標記細菌的觀察
效果。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科