標(biāo)題：熒光顯微鏡的效率主要取決于物鏡、濾光片和檢測(cè)器
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作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2014-7-5 0:58:28
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檢測(cè)顯微鏡的效率主要取決于物鏡、濾光片和檢測(cè)器
最通用的FP和EGFP非常明亮，因此即使在一般的表達(dá)水平，它們也具有較高的
信噪比。另外，兒種新引入的來(lái)源于珊瑚蟲(chóng)的FP顯示出遠(yuǎn)超出EGFP的熒光水平。所
有這些因素可以使成像的靈活性大增，甚至在顯微鏡光學(xué)條件和數(shù)碼相機(jī)特性不太理
想的狀況下也能有很高的實(shí)驗(yàn)成功率。盡管如此，習(xí)慣于使用免疫熒光采用內(nèi)源信號(hào)
擴(kuò)增成像的科研入員可能會(huì)發(fā)現(xiàn)FP的熒光比較弱。這種情況在實(shí)驗(yàn)需要使用一種弱光
突變體(如BFP, CFP或遠(yuǎn)紅外熒光蛋白)時(shí)更為明顯。在這種情況下，信噪比可能
相當(dāng)?shù)牡停虼诵枰獌?yōu)化FP的檢測(cè)。檢測(cè)的效率主要取決于三種因素:物鏡、濾光片
和檢測(cè)器。限于篇幅，無(wú)法在本章中討論如何選擇某些特定應(yīng)用的最優(yōu)組合的細(xì)節(jié)和
平衡優(yōu)化。但是有兒個(gè)通用的原則應(yīng)該被一直遵循。
雖然物鏡的選擇通常被最少考慮，但是在成像實(shí)驗(yàn)優(yōu)化配置時(shí)物鏡可能是最需要
重點(diǎn)考慮的因素。物鏡決定樣品成像的空間分辨率和控制從樣品收集的熒光址。通常
情況下，最好選擇具有最大數(shù)位孔徑(NA)的鏡頭，因?yàn)檫@樣可以最大可能地收集信
號(hào).其他在實(shí)際操作中需要考慮的因素還有工作距離、視野和在鏡頭設(shè)計(jì)中的光學(xué)校
正
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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