標(biāo)題：細(xì)胞的細(xì)微結(jié)構(gòu)標(biāo)記實(shí)驗(yàn)用熒光顯微鏡圖像分析軟件
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作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2014-7-9 21:28:42
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正文:
細(xì)胞的細(xì)微結(jié)構(gòu)標(biāo)記實(shí)驗(yàn)用熒光顯微鏡圖像分析軟件
當(dāng)微注射多克隆或單克隆抗體，或偶聯(lián)熒光的分子時(shí)，對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)步驟較
短。基本上，我們按照上述的方法加以改進(jìn)就可以了，即省去與第一抗體的濫育過(guò)程。如
果注人的是熒光標(biāo)記分子，我們只需進(jìn)行固定與封片兩個(gè)過(guò)程。但是根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件，盡管
已經(jīng)進(jìn)行了微注射，可能也需要與第一抗體進(jìn)行進(jìn)一步的溫育
利用抗體和電子致密標(biāo)記物，用電子顯微鏡進(jìn)行細(xì)胞外和細(xì)胞表面的抗原定位，在過(guò)
去的二十年間己經(jīng)證明是非常有效的工具。但是細(xì)胞內(nèi)成分的定位困難較大，因?yàn)楸仨?/div>
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
為抗體和標(biāo)記物提供通路.同時(shí)又不能明顯地改變細(xì)胞的細(xì)微結(jié)構(gòu).克服這一問(wèn)題有如下
兩個(gè)策略:
.利用去污劑或極性溶劑對(duì)固定細(xì)胞進(jìn)行透化處理，這樣會(huì)在一定的程度上(或是全部)
破壞細(xì)胞膜，使抗體與標(biāo)記物能夠進(jìn)人細(xì)胞。然后再對(duì)細(xì)胞做后固定和用普通環(huán)氧樹(shù)
脂包埋處理。這種技術(shù)被稱(chēng)為前包埋免疫細(xì)胞化學(xué)方法。
.先包埋固定的細(xì)胞，切片，然后與抗體和標(biāo)記物一起溫育。這種技術(shù)稱(chēng)為后包埋免疫細(xì)
胞化學(xué)方法。包埋在低溫下進(jìn)行.即在部分水溶性樹(shù)脂中或在含有冷凍保護(hù)劑的冰凍
溶液中進(jìn)行。
免疫電子顯微鏡技術(shù)常采用如下的標(biāo)記物:
.辣根過(guò)氧化物酶(HRP)
.膠體金顆粒
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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