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正文:
顯微鏡控制顯色方法
全部抗原抗體反應結(jié)束后,即置切片于PBS內(nèi)。可利用
15分鐘的洗滌時間,配制50毫升酶作用底物溶液
并準備50毫升醋酸緩沖液和
若干自來水洗缸,如系冰凍切片,尚需要4%甲醛液,以作
固定用。此外,應調(diào)整好顯微鏡的焦距和亮度,顯色過程應
在顯微鏡旁進行操作。
由于影響抗原抗體反應的因素甚多,因而所有免疫組化
染色技術均必須有陽性和陰性對照組,否則就不可能正確評
價染色的結(jié)果。一般抗體生產(chǎn)公司在出售商品抗體前,已經(jīng)
進行過抗體特異性和敏感性的鑒定。盡管如此,我們在使用
每一種新抗體前,仍有必要重復檢驗該抗體對正常組織和相
關抗原陽性組織等的染色結(jié)果,以獲得對該抗體特異性與敏
感性的確切概念?梢园堰@種重復檢驗工作和探討抗體稀釋
度的優(yōu)選試驗結(jié)合進行。
組織的固定和切片制作過程對抗原總有一定影響,因而
充分認識和正確估價各種不同固定液和切片技術對不同組織
包含之各種抗原的影響程度,從而選擇合宜的固定液或切片
方法,以達到檢測一定種類的組織抗原成分的目的。這是免
疫組化技術中十分重要的一環(huán)。一般來說,冰凍切片因未經(jīng)
任何固定液處理而能較好地保存抗原性,但使用受限,。且不
能作回顧性檢查。除設備較好的實驗室備有大型一70℃低溫
冰箱儲存冰凍組織能有計劃地進行冰凍切片免疫組化研究
外,很難推廣普及此法。由于近代高敏感的免疫組化染色方
法的發(fā)展,石蠟切片愈益廣泛地被用作免疫組化診斷和研
究。近年來證實,對于某些抗原來說,石蠟切片甚至優(yōu)于冰
凍切片。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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