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標(biāo)題:大分子可用電子顯微鏡直接觀察,樣品制備有許多技術(shù)

信息分類:站內(nèi)新聞   作者:yiyi發(fā)布   時間:2016-2-3 0:30:08 將本頁加入收藏

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正文:

大分子可用電子顯微鏡直接觀察,樣品制備有許多技術(shù)

   電子顯微鏡
  大分子可以用電子顯微鏡直接觀察,樣品制備有許多技術(shù),這
里介紹兩種。

  觀察核酸的常用方法是展開技術(shù),核酸分子比任何蛋白質(zhì)分子
都要大得多,把核酸分子包埋在一層蛋白質(zhì)膜中,于是它就襄上
一層蛋白質(zhì)分子,如圖所示,蛋白質(zhì)分子起兩個作用:

  1、它們使核酸分子伸展開來,原因如下,如果反悔很小體積
的蛋白質(zhì)溶液鋪到離子溶液表面,蛋白質(zhì)分子會展開形成蛋白質(zhì)
單層薄膜,如果核酸分子在蛋白質(zhì)溶液中,它們也隨蛋白質(zhì)膜擴(kuò)
展面伸展開來,核酸分子的伸展使得整個分子清楚可見,不至于
象在沒有伸展情況下看到的那種繚繞和分子間聚集。
  2、蛋白質(zhì)在核酸分子上形成一層厚的覆蓋層,這覆蓋層使核
酸分子容易看得見,為了觀察清楚還需要其他一些東西,因為僅
含小原子的分子對電子通常是近乎透明的,因此,為了使核酸分
子可見,覆蓋的蛋白質(zhì)層的分子還得涂上一層重金屬,這可以將
鉑原子 或沉積在蛋白質(zhì)涂層上,稱為染色,這些重原子是電子
良好吸收物,而背景支持物相對地很少吸收電子,因此,這引起
金屬離子提供了圖像的反差,在對于分子的長度和線狀拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)
感興趣而想觀察很長分子時,投影和染色是很有用的技術(shù)。

  如果用剛才所講的蛋白質(zhì)單層技術(shù)還不容易看清楚 ,或是在
對所研究分子的形狀和表面細(xì)節(jié)感興趣時,可以用另一種方法分
子, 這就是負(fù)反差技術(shù)。例如,蛋白質(zhì)分子如果包埋在蛋白質(zhì)
膜中,就無法看到,對此另一種可選擇的方法是涂一層非常薄的
金屬原子,如果這些原子很小,涂層也只有一二個原子厚,那么
這些原子就會沿著粒子的外形排列,這可以用很少量的原子染色
,但是更方便的是用負(fù)反差技術(shù),這種技術(shù)是觀察的蛋白質(zhì)分子
或病毒粒子與磷鎢酸,或鹽溶液混合,兩者都含有強烈吸收電子
的原子,然后將溶液滴涂在支持膜上,含有所研究的大分子或粒
子的微滴便在支持膜上干燥,微滴上有大分子在處有金屬離子的
厚度比其他地主要薄,把樣品放在電子束中時,穿過微滴大分子
區(qū)域的電子就多些,這樣就可得到一些或小的病毒粒子的負(fù)像,
用這各方法觀察到手病毒粒子和蛋白質(zhì)分子的電子顯微鏡照片。











出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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