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正文:
酶活測定通常都是在預(yù)定的溫度熔點儀
酶的分離與提純
如果想明了
生物體中酶的行為,必須設(shè)法先把酶純化。然后才
來研究純酶的物理和化學(xué)性質(zhì)。而為了更進一步深入研究酶活性中
心的結(jié)構(gòu),催化反應(yīng)的機理,以及整個酶分子的主體結(jié)構(gòu),則非把
最后殘留在酶中的微量非酶蛋白、其他酶蛋白和大分子化合物予以
清除不可。
分離酶首先要顧及最大的生產(chǎn)量,生產(chǎn)量常用原始酶抽出液中
的總酶活性和以后各步收得的酶活性相比所得的百分數(shù)來計算。其
次要顧及最大的催化活性,應(yīng)盡量使酶中不要有失活或死掉的分子
存在。再其次要使酶純度盡量達到最高,少含雜質(zhì)酶和別種大分子
化合物。
從前曾一度認為結(jié)晶法能夠使酶純化,不含一點雜質(zhì)。今天才
知道并不盡然,有些結(jié)晶酶并不很純,而許多純化手段并不包括結(jié)
晶這一步。當(dāng)然,如果想徹底分析整個酶分子的
立體結(jié)構(gòu),則非得
到晶形肥大完整的酶的單晶不可。
酶活性的測定通常都是在預(yù)定的溫度(多為4℃或25℃)和pH(多
為7.0左右)下,用濃度稍過飽和的底物和輔酶,來
測量底物的減
少量,產(chǎn)物的增加量或輔酶的增減量;钚缘拇笮∫悦糠昼姷孜锵
耗、產(chǎn)物生成或輔酶增減的煌mo,數(shù)來表示,稱作單位u,或國際
單位I.U。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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