標題：重組DNA分子包括至少5個步驟-生物細胞電子顯微鏡
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時間:2016-9-30 12:41:01
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正文:
新的重組DNA分子的產(chǎn)生包括至少5個步驟。
(1)DNA的準備�，F(xiàn)在，DNA通常是通過聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)產(chǎn)生的。
PCR技術(shù)在第6章講述過，是在恒溫條件下DNA聚合酶與正向、反向引物
進行變性、復(fù)性、延伸的循環(huán)周期的過程。PCR的結(jié)果是DNA的大量擴增
與復(fù)制。模板DNA最好是來源于通過反轉(zhuǎn)錄酶作用于mRNA得到的cDNA，
這樣避免了擴增序列中存在的內(nèi)含子。有時DNA也可來源于限制性內(nèi)切
核酸酶的酶切產(chǎn)物。
(2)限制性內(nèi)切核酸酶切割。含有黏性末端的特定長度的DNA片段的
產(chǎn)生是DNA重組技術(shù)所必需的。這樣插入物(DNA片段)可以與含有相應(yīng)黏
性末端的載體連接。現(xiàn)在，通過PCR產(chǎn)生的DNA片段通常含有限制性內(nèi)切
核酸酶位點，從而使后面的克隆反應(yīng)更容易進行，并且很多種限制性內(nèi)
切核酸酶都可以從公司購買。
(3)DNA片段的連接。在克隆過程中插人物與載體DNA結(jié)合的過程叫
做連接。如果沒有DNA片段的共價連接以及環(huán)狀DNA的形成，后面的轉(zhuǎn)化
反應(yīng)效率會很低。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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