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標題:細胞臨時涂片、永久涂片和切片技術(shù)的應用

信息分類:站內(nèi)新聞   作者:yiyi發(fā)布   時間:2016-11-12 13:08:41 將本頁加入收藏

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正文:

細胞臨時涂片、永久涂片和切片技術(shù)的應用


減數(shù)分裂染色體的研究
    高等植物的減數(shù)分裂發(fā)生在花藥組織中,有花粉母細胞以及胚
珠中的大孢子母細胞。胚珠由數(shù)層營養(yǎng)生長的細胞包圍,一個胚珠
里面只有一個大孢子母細胞,所以很難觀察。另一方面,花藥擁有
大量的花粉母細胞,所以將花藥擠破就很容易看到。因此,減數(shù)分
裂研究所用的材料通常為花粉母細胞。為了研究某個物種減數(shù)分裂
中的染色體行為。前期工、中期I和中期Ⅱ是較適宜的時期(圖18—
2)。因此,需要選擇適宜大小的花蕾來獲得恰當?shù)臏p數(shù)分裂的分裂
相。研究減數(shù)分裂的方法有I臨時涂片法、永久涂片法和切片法等
不同方法。
    1.臨時涂片法(醋酸洋紅染色)
    (1)取蕾從一個花序上取一系列的花蕾,包括從最小的到最大
的花蕾,直到找到合適大小的分裂相的花蕾。取材的時問以晴朗的
白天8:0O~14:00都可。如果在田間采集花蕾.可置于醋酸與酒
精之比為l:2的混合液中固定1~2d。在這種情況下,在涂片前只
需轉(zhuǎn)入45%醋酸溶液5~10min,固定的花蕾可貯存在70%酒精中。
    (2)固定染色加一滴1%醋酸洋紅于一干凈無油脂的載玻片上,
用解剖針從一適宜大小的花蕾上挑取2~3個花藥,置于固定染色的
混合液中。
    (3)涂片用鐵解剖刀將花藥中的內(nèi)含物輕輕擠出.去除雜質(zhì),
蓋上蓋玻片,玻片在酒精燈上稍微加熱,輕壓蓋玻片,將多余的染
液擠走。
    (4)觀察玻片用石蠟封片.顯微鏡下觀察。如果封片較好該玻
片可在低溫下保持
    l~4周。
    (5)永久制片采用叔丁醇法制成永久片。











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