標(biāo)題：電鏡實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和分離
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2016-12-4 2:30:34
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正文:
電鏡實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和分離
免疫標(biāo)記
在現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究中，在細(xì)胞結(jié)構(gòu)和分離得到的大分子中
對(duì)抗原進(jìn)行免疫標(biāo)記顯得相當(dāng)重要。免疫標(biāo)記技術(shù)可以在樹(shù)脂包埋
生物材料前／后應(yīng)用(包埋前／后標(biāo)記，，也可以與負(fù)染色法(詳見(jiàn)
實(shí)驗(yàn)方案2．3)、玻璃化法以及金屬投影技術(shù)很好地結(jié)合。膠體金
是連接抗體(IgG／Fab／Fab’)或者其他配體如蛋白A／蛋白G、卵
白素／抗生物素蛋白鏈菌素(生物素化的蛋白)以及凝集素的最常用
的高電子密度標(biāo)記物�？梢再�(gòu)買到的膠體金顆粒直徑為1～20nm不
等，可以在同一組織上利用不同大小的膠體金標(biāo)記的抗體(二抗)作
多重標(biāo)記。包埋后最重要的是抗原性的保持。包埋后標(biāo)記的一個(gè)潛
在困難就是待測(cè)抗原決定簇可能經(jīng)受不了在脫水、包埋之前常規(guī)應(yīng)
用高濃度固定劑[如3％戊二醛(體積分?jǐn)?shù))]進(jìn)行組織固定。所以，2
％甲醛一o．5％戊二醛(體積分?jǐn)?shù))常用于固定，它們可以保存細(xì)胞
蛋白質(zhì)的抗原性，但是對(duì)于組織結(jié)構(gòu)的固定效果就略顯不足。近來(lái)
可以購(gòu)買到1．4nm金顆粒(NanogoldTM)標(biāo)簽以及o．8nm 11金標(biāo)簽
。這些探針可與抗體和鏈親和素連接，在將來(lái)可能對(duì)高分辨率的細(xì)
胞及大分子標(biāo)記領(lǐng)域產(chǎn)生越來(lái)越深遠(yuǎn)的影響。
專門技術(shù)
真空鍍膜術(shù)、超薄切片術(shù)、冰凍超薄切片術(shù)、高壓凍存術(shù)、冷
凍置換術(shù)、冰凍斷裂術(shù)以及活塞冰凍術(shù)的使用都不包括在本書(shū)的范
圍之內(nèi)，在別處都能找到完全的操作步驟，但是建議最好直接從電
鏡實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員或科研人員處學(xué)習(xí)。通常在局部的統(tǒng)籌安排和
資金的支持下，電鏡實(shí)驗(yàn)室的工作人員會(huì)作為服務(wù)性角色向?qū)嶒?yàn)室
的所有儀器使用人員提供相關(guān)
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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