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正文:
0.2微米微孔濾膜適于一般情況滅菌-細(xì)菌
顯微鏡
溶液的過(guò)濾除菌
許多用于細(xì)胞培養(yǎng)的溶液中含有一種或多種對(duì)熱不穩(wěn)定的成分
(如抗生素),或幾種成分構(gòu)成的體系(如磷酸鹽緩沖體系),如果將
它們進(jìn)行高壓蒸汽消毒,則會(huì)生成有毒的沉淀物。因此,使用膜濾
器對(duì)這些溶液進(jìn)行冷消毒是最普遍的方法。
0.2微米微孔濾膜適于一般情況滅菌;然而,一些環(huán)境應(yīng)激細(xì)
菌(如假單胞菌屬SP.)及支原體就能夠通過(guò)這類(lèi)濾膜。為了能最大
限度地去除這些組織培養(yǎng)中常見(jiàn)的微
生物污染,就要采用孔徑為0
.1微米微孔濾膜過(guò)濾培養(yǎng)液和血清。濾膜制造商可提供不同類(lèi)型
的濾膜。就細(xì)胞培養(yǎng)而言,醋酸纖維素或硝酸纖維素濾膜通常用于
過(guò)濾諸如培養(yǎng)液和緩沖液等液體。值得注意的是,在使用前應(yīng)該用
熱的去離子水沖洗薄膜,清除其中可能引起細(xì)胞毒性的可溶性物質(zhì)
。尼龍膜含較少的表面活化劑或潤(rùn)濕劑等可溶性物質(zhì);聚乙烯磺酸
膜中含少量的可溶性物質(zhì)并很少與蛋白質(zhì)結(jié)合。
確定和控制細(xì)胞培養(yǎng)的
微生物污染
細(xì)菌和真菌污染可以通過(guò)在有利于細(xì)菌、真菌和酵母生長(zhǎng)的條
件下直接培養(yǎng)而檢測(cè)。同樣地,檢測(cè)支原體污染的直接方法也可用
微生物培養(yǎng)基促使支原體繁殖,再進(jìn)行篩查。微生物污染能夠通過(guò)
使用抗生素而得到控制。微生物污染的檢測(cè)應(yīng)列人細(xì)胞培養(yǎng)質(zhì)量控
制的常規(guī)項(xiàng)目。微生物和支原體的檢測(cè)還應(yīng)在剛收到細(xì)胞系時(shí),為
細(xì)胞庫(kù)主庫(kù)和運(yùn)作庫(kù)以及保種所準(zhǔn)備的安瓿樣本進(jìn)行檢查。這種檢
查還可以在任何時(shí)候、懷疑有污染、沒(méi)有抗生素存在而細(xì)胞已經(jīng)培
養(yǎng)了幾個(gè)星期的情況下進(jìn)行。
注意:為了避免細(xì)胞系不小心被污染,細(xì)菌、真菌的檢測(cè)應(yīng)在
不從事細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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