標(biāo)題：懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞傳代生物實(shí)驗(yàn)圖像顯微鏡
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2016-12-24 1:09:32
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正文:
懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞傳代
1．每2～3天后細(xì)胞生長(zhǎng)密集，輕輕地將懸液培養(yǎng)的細(xì)胞從孵育箱
中取出而不要搖動(dòng)
它，此時(shí)細(xì)胞沉降在瓶的底部。去掉1／3的舊液，加入等量的預(yù)
熱培養(yǎng)液。如果培
養(yǎng)液體積小于15ml，輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞懸浮，然后水平放人
培養(yǎng)箱。
2．在不需要更換培養(yǎng)液的培養(yǎng)期內(nèi)，只需搖動(dòng)培養(yǎng)瓶使
細(xì)胞懸浮，觀察培養(yǎng)液顏色的
變化，它直接顯示細(xì)胞生長(zhǎng)代謝狀況。
3．當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)到2．5×10的3次方個(gè)／ml時(shí)進(jìn)行傳代。從培養(yǎng)箱中取
出培養(yǎng)瓶，搖動(dòng)以重懸細(xì)
胞。將一半的細(xì)胞懸液移入一個(gè)新培養(yǎng)瓶中，每瓶再補(bǔ)加預(yù)熱的
培養(yǎng)液7～lOml，
然后放人培養(yǎng)箱。
1．用70％乙醇清洗血細(xì)胞計(jì)數(shù)板表面及其蓋玻片，自來(lái)水輕微潤(rùn)濕蓋
玻片的邊緣，并
將它緊貼在計(jì)數(shù)板的溝槽上，水平蓋住銀色計(jì)數(shù)區(qū)。
2．對(duì)于單層貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，用胰蛋白酶消化法使細(xì)胞從壁表面
分離下來(lái)。3．按需要將細(xì)胞稀釋成均勻的懸液，細(xì)胞團(tuán)塊均需分
散。4．用一支無(wú)菌的巴氏滴管取細(xì)胞懸液并將其轉(zhuǎn)移至血細(xì)胞計(jì)
數(shù)板計(jì)數(shù)室的邊緣，用滴
管頭滴一滴在計(jì)數(shù)板蓋玻片的下方，使之充盈到第二個(gè)計(jì)數(shù)室。
5．開(kāi)始計(jì)數(shù)前將計(jì)數(shù)板靜置幾分鐘，吸去多余的液體。用100×顯
微鏡觀看到一個(gè)大方
格狀的中心區(qū)。用手握式計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)四角及中心小方格內(nèi)的細(xì)胞
數(shù)，其中壓上線和
壓左線的細(xì)胞包含在內(nèi)。重復(fù)計(jì)數(shù)另一小室的細(xì)胞。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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