標(biāo)題：海洋微型生物研究光學(xué)顯微鏡-顯微技術(shù)
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2016-12-24 20:44:48
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正文:
微型生物個(gè)體極小，成為阻礙研究發(fā)展的攔路虎。微型生物的研究
進(jìn)程在很大程度上取決于技術(shù)的進(jìn)步。從技術(shù)手段上說(shuō)，微型生物
研究舞臺(tái)上演了三部曲：以顯微技術(shù)為基礎(chǔ)的觀察分析，以流式細(xì)
胞技術(shù)為基礎(chǔ)的快速定量，以分子生物學(xué)技術(shù)為基礎(chǔ)的多樣性分析
與功能基因分析。顯微技術(shù)(Microscopy)
沒有顯微鏡就沒有海洋微型生物研究。
20世紀(jì)80年代以前，在微型生物研究技術(shù)舞臺(tái)上顯微鏡是絕對(duì)的
主角，直到今天，顯微技術(shù)仍然是微型生物研究必不可少的手段。
這里只簡(jiǎn)介最常用的透射電子顯微技術(shù)(Transmission E1ectronic
Microscopy，TEM)和表面(落式)熒光顯微技術(shù)(Epifluorescence
Microscopy，EFM)。
TEM是了解生物體亞顯微結(jié)構(gòu)的可靠方法。大洋環(huán)境中聚球藻
的發(fā)現(xiàn)和確認(rèn)就是TEM觀察的結(jié)果。TEM在原綠球藻的發(fā)現(xiàn)和定種上
也起到了至關(guān)重要的作用。目前，海洋病毒的觀察、分類工作仍主
要由TEM來(lái)完成。TEM方法可以觀測(cè)到包含有病毒粒子的尚未裂解的
細(xì)胞，為微食物環(huán)(Microbialloop)和病毒環(huán)(Virus 100p)的研究
提供了重要參數(shù)，具有其他方法無(wú)法超越的優(yōu)勢(shì)。但是TEM由于其
制樣和觀測(cè)的復(fù)雜性，不適用于自然生態(tài)調(diào)查中超微型浮游生物群
落的定量研究。
與TEM相比，EFM觀測(cè)需要的水樣量小，制樣過程簡(jiǎn)單，觀察和
操作快速。采用熒光染色的方法，EFM能區(qū)分并定量細(xì)菌、藍(lán)細(xì)菌
和真核細(xì)胞。盡管細(xì)胞經(jīng)過固定染色處理后大小會(huì)改變，尤其是甲
醛固定會(huì)造成細(xì)胞收縮，染色后細(xì)胞大小的測(cè)定也會(huì)由于熒光的光
暈而受到干擾，但是EFM在細(xì)胞的大小和形態(tài)觀測(cè)上仍具有一定的
優(yōu)勢(shì)。值得注意的是，在沒有改進(jìn)的EFM技術(shù)規(guī)程中，原綠球藻往
往會(huì)被誤計(jì)為細(xì)菌其在貧營(yíng)養(yǎng)大洋造成的細(xì)菌正誤差可達(dá)30％
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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