標(biāo)題：細(xì)胞通過(guò)冷凍和在液氮中儲(chǔ)存，可被長(zhǎng)期保存
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作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2016-12-26 12:50:46
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正文:
細(xì)胞通過(guò)冷凍和在液氮中儲(chǔ)存，可被長(zhǎng)期保存
冷藏
通過(guò)冷凍和在液氮中儲(chǔ)存，細(xì)胞可被長(zhǎng)期保存。影響細(xì)胞凍存成功
與否的重要因素包括凍存速率、冷凍保護(hù)劑的類型和濃度及細(xì)胞濃度。
盡管采用程序控制的細(xì)胞冷凍儀能取得最佳的效果，但使用其他方法也
可控制凍存速率。例如采用一個(gè)厚壁的聚苯乙烯盒，放置于一80℃冰箱
中，或放在一個(gè)可放人液氮細(xì)胞庫(kù)頸口的特殊裝置中，將細(xì)胞保持在氣
相中，使其慢慢降溫。然而這些方法不能像程序降溫儀那樣在凍存細(xì)胞
復(fù)蘇時(shí)獲得較高的存活率。避免細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成很關(guān)鍵，可以通過(guò)以
下幾種方法將其發(fā)生率減到最低，包括加入冷凍保護(hù)劑[如二甲基亞砜
或者甘油]、增大血清濃度、大量的細(xì)胞數(shù)和緩慢降溫。對(duì)于大多數(shù)哺
乳類動(dòng)物細(xì)胞，最適降溫速率為一1℃／min。最常用的冷凍保護(hù)劑是10
％(體積分?jǐn)?shù))二甲基亞砜，這里的實(shí)驗(yàn)方案概括性地描述了它的用法，
但對(duì)于某些細(xì)胞它可能是有毒的(注：二甲基亞砜是一種極性溶劑，可
與溶解其中的任何物質(zhì)一起滲透人體皮膚，處理二甲基亞砜時(shí)要小心，
并戴上防護(hù)手套)。
細(xì)胞復(fù)蘇方法也很關(guān)鍵，應(yīng)避免滲透沖擊。凍存細(xì)胞應(yīng)快速融化至
37℃，在培養(yǎng)基中緩慢稀釋。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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