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正文:
(1)固定的方法歸納有物理的和化學(xué)的兩種。物理的固定法是
利用高溫、冰凍或干燥等手段來保存細(xì)胞結(jié)構(gòu)和組分,如冰凍干燥
掏定法,冰凍替換法皆屬此類;化學(xué)的固定法是利用化學(xué)試劑(或
磺周定劑)來保存細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和組分,如常規(guī)的固定法、活組織原
位固定法、動(dòng)脈內(nèi)灌注固定法及雙重固定法等皆屬于此類。
(2)固定時(shí)注意事項(xiàng)
口)根據(jù)不同材料、不同的組織部位,選擇適宜的固定液。
‘
6)固定時(shí),一般在0℃一4℃下進(jìn)行,所用器械、容器最好預(yù)冷
,但也有例外的。
c)固定液用量不宜少于組織塊體積的五倍(一般約2—3
m1)。
d)固定時(shí)閥視不同組織、不同固定液蔚定,一般約30一60分鐘
為宜。植物材料可適當(dāng)延長固定時(shí)間。
e)固定器皿不宜大(一般用洗凈的小稱量瓶或青霉素小瓶則可)
。
,)組織塊要小(約0.5一1.0 8次方mm),以利于固定液滲透。
9)對(duì)有毒性或刺激性的試劑要注意防護(hù)措旋,盡量避免對(duì)人體
的危害。
塊染
為提高切片的電子反差,組織塊可在固定后,脫水前進(jìn)行特殊
的染色處理。如用醋酸鈉或巴比妥納一醋酸鈉緩沖液配制的鋨酸固
定液固定的材料,經(jīng)洗凈后,可在室溫下,用醋酸鈾染色20一30分
鐘,既可起固定作用又起染色作用。也可在脫水至70%的酒精或丙
酮時(shí),用1—2%的醋酸雙氧鈾染色4—12小時(shí)或置冰箱過夜,塊染
對(duì)于提高某些植物組織細(xì)胞,尤其是高度液泡化、衰老或損傷的植
物組織細(xì)胞的電子反差均有良好的效果。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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