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正文:
桿菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)實驗分析
顯微鏡
掌握最新的DNA操作技術需要熟悉一些相關的基本概念和實驗技巧
。本章著重介紹了大腸桿菌以及用于將DNA引入細菌的質(zhì)粒和噬菌
體等載體的
生物學特性和操作方法,并由此提供了一些基本概念和
實驗技巧。
大腸桿菌是含有長約3000 kb左右的環(huán)狀染色體的棒狀細菌。
它能在僅含碳水化合物如葡萄糖(提供碳源和能量)和提供氮、磷和
微量元素的無機鹽的極限培養(yǎng)基上快速生長。然而,如果用含氨基
酸、核苷酸前體、維生素以及其他一些細胞不能合成的代謝成分的
豐富培養(yǎng)基來培養(yǎng),那么大腸桿菌的生長會更快。
當大腸桿菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)時,其開始裂殖前,先進入一
個生長滯后期。在豐富培養(yǎng)基中,它能在20~30min內(nèi)復制一代,
這種指數(shù)生長相稱之為對數(shù)期。最后,當培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分和氧
耗盡或當培養(yǎng)基中廢物的含量達到抑制細菌的快速生長的濃度時,
菌體密度就達到一個比較恒定的值。
除了極少數(shù)的例外,大多數(shù)應用于DNA重組技術的細菌是大腸
桿菌K一12株的衍生菌株。許多分子生物學研究進展均得益于對這
個菌株以及以這個菌株為宿主菌的噬菌體和質(zhì)粒所進行的研究;而
且現(xiàn)在應用的很多克隆技術也都得益于這個時期的研究成果。
在克隆方案中經(jīng)常使用細菌質(zhì)粒。在天然的大腸桿菌分離株中
可含有_些自主復制、環(huán)狀的染色體外DNA分子,它們具有重要的生
物學功能如抗生素抗性和產(chǎn)生限制性酶。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科