標(biāo)題：污泥的培養(yǎng)(培菌)快速簡(jiǎn)便的特點(diǎn)-圖像顯微鏡
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作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2017-1-20 12:54:36
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正文:
污泥的培養(yǎng)(培菌)快速簡(jiǎn)便的特點(diǎn)-圖像顯微鏡
活性污泥的培養(yǎng)(培菌)
當(dāng)質(zhì)粒較大時(shí)可考慮用膜吸附法或用非離子型去污劑初步抽提，然
后用CsCl法進(jìn)一步純化。相反，當(dāng)質(zhì)粒DNA的宿主菌為JM系列或HBl01、
TGl等衍生菌株時(shí)不宜用CsCl法純化，這是因?yàn)檫@些菌中含有大量的糖
類物質(zhì)，CsCl離心后會(huì)在超螺旋質(zhì)粒DNA位置形成一條致密與模糊的區(qū)
帶，難以完全除盡這些糖類物質(zhì)，從而造成抑制后續(xù)酶反應(yīng)進(jìn)行。除糖
類物質(zhì)外，這類菌株中還含有較多核酸酶，也不適于用煮沸法、酚／氯
仿等快速法抽提質(zhì)粒。因?yàn)橐陨戏椒m然步驟簡(jiǎn)單但往往不能使DNA酶
徹底變性失活，嚴(yán)重時(shí)甚至使抽提產(chǎn)物降解。當(dāng)質(zhì)粒DNA要長(zhǎng)期使用時(shí)
也不宜用快速法抽提，以防止保存過程中殘留的微量核酸酶降解DNA。
此外，選擇DNA提取方法還須考慮質(zhì)粒DNA的用途。如DNA僅用于抽提后
檢測(cè)插入片段時(shí)，則可選用快速的酚／氯仿法。如果插入片段用于標(biāo)記
探針且與同類宿主菌的DNA雜交時(shí)，就不能選用此法，這是因?yàn)榉樱?/div>
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
仿抽提質(zhì)粒時(shí)未能將所有染色體DNA全部變性除去，酶切后回收的插入
片段中可能含有極微量的染色體DNA。相反，如果用于酶切鑒定時(shí)，這
些未除盡的染色體DNA很少，不會(huì)干擾反應(yīng)，這時(shí)選用快速提取法便顯
出快速簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，特別有利于大量篩選重組子。當(dāng)然，除了標(biāo)記探針
外，質(zhì)粒用于測(cè)序等時(shí)需要高純度DNA，應(yīng)該應(yīng)用堿法、CsCl法或膜吸
附法提取。總之，選擇抽提方法時(shí)要根據(jù)具體情況
而定。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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