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標題:細菌、真菌和酵母生長條件下直接培養(yǎng)顯微鏡檢測

信息分類:站內新聞   作者:yiyi發(fā)布   時間:2017-3-16 17:25:41 將本頁加入收藏

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正文:

細菌、真菌和酵母生長條件下直接培養(yǎng)顯微鏡檢測

確定和控制細胞培養(yǎng)的微生物污染

  細菌和真菌污染可以通過在有利于細菌、真菌和酵母生長的條件下
直接培養(yǎng)而檢測。同樣地,檢測支原體污染的直接方法也可用微生物
養(yǎng)基促使支原體繁殖,再進行篩查。微生物污染能夠通過使用抗生素而
得到控制。微生物污染的檢測應列人細胞培養(yǎng)質量控制的常規(guī)項目。微
生物和支原體的檢測還應在剛收到細胞系時,為細胞庫主庫和運作庫以
及保種所準備的安瓿樣本進行檢查。這種檢查還可以在任何時候、懷疑
有污染、沒有抗生素存在而細胞已經培養(yǎng)了幾個星期的情況下進行。

  細胞的能動性

  真核細胞運動和對周圍環(huán)境作出反應的能力是細胞形態(tài)發(fā)生的關鍵
,也是腫瘤細胞侵襲的基礎。大多數細胞具有向化學吸引劑遷移的能力
。在趨化運動方面,細胞須能辨認化學梯度的方向,使自己朝向化學梯
度做定向運動。調節(jié)細胞趨化運動的過程較復雜,包括伸出偽足、附著
于底物和解除原有附著等。

  正常情況下,示蹤大分子物質不能進入細胞內。細胞修復時,細胞
內含有示蹤物質。最適合用于研究細胞動力學的細胞是盤基網柄菌屬阿
米巴蟲,這類細胞以分散形式生長,但饑餓時很快聚集成簇,形成多細
胞結構。在聚集成簇過程中,阿米巴表現趨化運動、信號轉導、細胞膜
波動、吞噬和分裂等一系列不同行為。以便研究野生型細胞和基因修飾
細胞系的能動性和趨化性行為。真核細胞趨化實驗

  趨化是指細胞沿化學梯度定向運動的傾向,有助于細胞做變形運動
和在炎癥部位聚集。策略設計

  細胞根據趨化受體與化學吸引劑結合的變化探測化學吸引劑濃度的
變化;瘜W梯度最陡和吸引劑濃度稍低于與受體結合呈飽和狀態(tài)時,趨
化劑與受體結合的變化最大;瘜W梯度按一定坡度呈直線形上升(如趨
化劑濃度升高lo倍,坡度超過1 mm)時,稍低于受體Ka的化學吸引劑濃
度(該濃度使1/2受體被結合),引起的細胞趨化較理想。因為化學梯度
的幾何曲線在不同實驗是不同的,所以在合適濃度范圍內需要達到較陡
梯度的濃度也不同。在細胞遷移的整個過程中,梯度取決于合適濃度和
梯度坡度。

  恰當的實驗體系選擇受下列4個因素影響:①被研究細胞的運動速
率;②實驗目的(鑒定一種因子是否具有趨化性或評價趨化機制);③完
成實驗的恰當時間;④細胞和化學吸引劑的可靠性(實驗取決于細胞數
目和化學吸引劑總量










出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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