標(biāo)題：旋轉(zhuǎn)珠磨大容量實(shí)驗(yàn)竄珠磨細(xì)胞破碎儀-細(xì)胞顯微鏡
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2017-7-3 19:07:15
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旋轉(zhuǎn)珠磨大容量實(shí)驗(yàn)竄珠磨細(xì)胞破碎儀-細(xì)胞顯微鏡
對(duì)微生物的破碎過程大約耗時(shí)l～5分鐘
旋轉(zhuǎn)珠磨法，：大容量的實(shí)驗(yàn)竄珠磨細(xì)胞破碎儀通常使用旋轉(zhuǎn)
來代替振動(dòng)以引起小球運(yùn)動(dòng)，通過裝備外側(cè)冷卻裝置以避免大量處
理樣本的過熱。是一種常用的旋轉(zhuǎn)珠磨勻質(zhì)機(jī)，可以在3～5min內(nèi)
處理250 ml。的樣品，其中細(xì)胞濃度可以達(dá)到40％。
盡管之前所提及的細(xì)胞破碎儀主要用于微生物，但它們同時(shí)也
可以廂于勻質(zhì)并提取植物和動(dòng)物組織，對(duì)于軟組織和硬的或纖維性
的樣品均可使州，如皮膚、筋腱或者葉子等、球磨法的提取量通常
大于其他方法，．對(duì)于核酸的分離而言，細(xì)胞破壞可以在苯酚或異
硫氰酸胍等提取液中進(jìn)行，這樣可以消除核酸酶的影響并提高產(chǎn)鼙
當(dāng)應(yīng)用于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)時(shí)，應(yīng)使用一次性管以避免交叉
污染。在進(jìn)行選擇性勻質(zhì)時(shí)，可以選擇不同大小的小珠或不同的攪
動(dòng)速度。
細(xì)胞裂解的非機(jī)械方法酶裂解在酶裂解法中，酶作用于細(xì)胞壁上
特定的鍵，在破壞細(xì)胞壁的同時(shí)對(duì)于細(xì)胞的機(jī)械損傷是最小的一這
種方法受限于釋放細(xì)胞周質(zhì)或表面酶。
蛋白溶菌酶廣泛應(yīng)用于革蘭氏陽性菌原生質(zhì)球的處理中，如巨
大芽孢桿菌、溶壁微球菌、藤黃八替球菌和糞鏈球菌。蛋白溶菌酶
與螫合劑一同使用，可片j于特定革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的部分溶解
，如大腸桿菌、變形桿菌、氣桿菌、假單胞菌和紅螺菌：裂解消化
反應(yīng)通常在中性或弱堿性的低滲蔗糖稀釋液(0．3～0．5mol／L)等
具有一定滲透壓的溶液巾進(jìn)行，0．1～1．0mg／mL的溶菌酶在30分
鐘內(nèi)可使樣品完全變?yōu)樵|(zhì)體。
與革蘭氏陽性菌不同，革蘭氏陰性菌的肽聚糖結(jié)構(gòu)對(duì)溶菌酶很
敏感。然而，酶卻不能透過其外層的膜，l對(duì)此需要先將膜去除，
凍融法、乙二胺四乙酸(EDTA)處理均可，某些情況F還可使用多粘
菌素B等抗生素。革蘭氏陰性菌肽聚糖的破壞并不能除去其外層膜
，其滲透性的敏感結(jié)構(gòu)會(huì)導(dǎo)致原生質(zhì)球而非原生質(zhì)體的生成、
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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