信息分類:生物-生命科學資訊
作者:yiyi發(fā)布
時間:2012-1-15 20:04:59
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正文:
研究海鱺成長脂肪量與其脂肪細胞數(shù)目大小分布的關(guān)系!
本研究的目的是探討海鱺成長、脂肪蓄積量與其脂肪細胞數(shù)目大小分布的關(guān)系,并了解是否能經(jīng)由調(diào)整海鱺飼料中的油脂質(zhì)量來改變
海鱺幼魚的肌肉中所含的脂肪細胞數(shù)目及大小分布,以達到調(diào)控脂肪蓄積量的目的。以求實驗結(jié)果能在商業(yè)飼料上有實際的應用價值。
材料與方法
一、 實驗動物
本實驗以海鱺 ( Rachycentron canadum)為實驗動物。
二、 養(yǎng)殖系統(tǒng)
進行海鱺養(yǎng)殖時,以圓形玻璃纖維水缸 (直徑 1m、水位高 30 –
40cm)采流水式飼養(yǎng),每缸放置一顆打氣石,以通風管連接鼓風機進
行打氣,試驗期間水溫維持在 28℃,鹽度維持在 30±1 ppt。
三、實驗設計
實驗一、確認成年海鱺體脂肪細胞的分布狀況,將成年海鱺 (n=3)魚肉自鰓蓋到臀鰭上方為止整塊取下,側(cè)線以上為背肉、以下為腹
肉。取下的魚肉分為前中后三區(qū),分析粗脂肪含量與脂肪細胞數(shù)目及大小分布,
用來確定海鱺新生成的體脂肪細胞是否分布在腹、背部前方,并為后續(xù)的實驗確認魚體取肉部位。
實驗二、探討大型海鱺養(yǎng)殖場于相同環(huán)境下所飼養(yǎng)的海鱺 (從幼
苗到成魚),粗脂肪含量與脂肪細胞數(shù)目及大小分布的相關(guān)性。每 4
週采樣一次 (n=3),觀察海鱺幼魚到成魚體脂肪蓄積量與脂肪細胞數(shù)
目及大小分布的變化,探討海鱺體脂肪組織成長是否經(jīng)由脂肪細胞數(shù)
目變多和細胞變大而來。采樣部位同實驗一
實驗三、飼料中不同油脂來源對海鱺幼魚體脂肪蓄積量的影響,
探討相同油脂含量的飼料中,以玉米油取代魚油是否會改變體脂肪的
蓄積量;A(chǔ)飼料以魚粉及魚油為主要的脂質(zhì)源,試驗組以玉米油取
代魚油。共計兩種飼料,每組三重覆,養(yǎng)殖實驗預計進行八週。采樣
部位同實驗一。
四、實驗分析方法
1. 飼料粗成分分析
包括水分、灰分、粗蛋白質(zhì)、粗纖維、粗油脂,粗油脂以油脂熱
萃取機 (Soxtec System HT 1043 Extraction Unit),其余依照 A.O.A.C.(1984)來測量。
2. 魚肉粗油脂分析
以油脂熱萃取機 (Soxtec System HT 1043 Extraction Unit)分析魚
肉樣品中粗油脂的含量。
3. 脂肪細胞計數(shù)
依照 (Fauconneau et al., 1997)的實驗步驟,新鮮魚肉樣品 100mg
經(jīng) 2%鋨酸溶液固定后,以 8M 的尿素溶液溶解未被固定的物質(zhì),經(jīng)
適當孔徑的濾紙過濾后以光學顯微鏡檢視脂肪細胞大小分布、血球計
數(shù)盤分析脂肪細胞數(shù)量。
4. 冷凍切片
處理過程依冷凍切片製作方法製成冷凍切片,觀察脂肪細胞在魚
肉中的分佈情況。
預期結(jié)果
研究的結(jié)果可以確定海鱺飼料中油脂來源及含量是否影響魚體
脂肪細胞的數(shù)量及大小分布變化。實驗結(jié)果可以作為之后海鱺飼料配
方的參考依據(jù)。
可能遭遇的困難
避免海鱺養(yǎng)殖過程所發(fā)生死亡狀況。脂肪細胞的固定、萃取及過
濾計數(shù)之操作過程可能流失部分細胞樣本造成實驗誤差。
重要儀器設備
冷凍切片機
養(yǎng)殖設備
飼料配置設備
脂肪熱萃取機
粗纖維萃取器
總氮蒸餾機
光學顯微鏡
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