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冷凍切片機簡易操作步驟

信息分類:金相文章   作者:yiyi發(fā)布   時間:2011-12-3 17:48:04 將本頁加入收藏

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冷凍切片機簡易操作步驟
1. 將標(biāo)本臺木(鋁材質(zhì))置于快速冷凍臺上降溫。
2. 待標(biāo)本臺木降溫后(約10-15分鐘),由快速冷凍臺取出,平置于桌面。滴一滴冷凍包埋劑(cryo tissue embedding compound)于鋁質(zhì)標(biāo)本臺朝上之一端。然后將新鮮材料切成約3-5 mm長或?qū)捴笮,并將材料埋入冷凍包埋劑中。再?-3滴于標(biāo)本上使之完全包埋,并立即將標(biāo)本臺木放回快速冷凍臺降溫。包埋時,要求動作干凈,利落,迅速,并切記勿使標(biāo)本周圍產(chǎn)生氣泡。
3. 約3-5分鐘后冷凍包埋劑即完全凝結(jié),即可將標(biāo)本臺木裝架在切片機之標(biāo)本固定夾上。設(shè)定切片角度,切片厚度及操作箱溫度,進行冷凍切片。
4. 調(diào)整切片刀上方壓克力制反卷曲裝置(anti-roll device)之位置及間隙,使其前緣與切片刀之刀刃平行。
5. 進行單片切片,若反卷裝置調(diào)整適當(dāng),則切片應(yīng)如三明治狀夾在切片刀與反卷曲壓克力裝置之間。
6. 將反卷曲壓克力裝置向上移開,取常溫之清潔玻片,使之與切片靠近貼合。低溫之切片遇常溫之玻片即展平并融解。切片需暫存放于無灰塵的切片盒中晾干,并使標(biāo)本與載玻片充分黏合,再進行下一階段的染色,以避免材料中途脫落。
☆ 注:各種生物標(biāo)本之質(zhì)地差異頗大,冷凍切片之成敗關(guān)鍵在于操作箱的溫度,一般而言,植物材料所需的溫度較高,可由-17℃~-18℃開始試切,
視結(jié)果再作溫度調(diào)整。動物標(biāo)本則可忍受較低的溫度,尤其含脂肪量  高的標(biāo)本在-20℃~-30℃之間為適當(dāng)?shù)臏囟。整體而言,刀口的溫度
 -10℃至-20℃之間,可以滿足約80%標(biāo)本的溫度需求。

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