評(píng)估影響細(xì)菌生長(zhǎng)不同因子

a. pH 值：

取5l
μ 隔夜培養(yǎng)的菌液于四種不同 pH 值的 LB Broth 中，在 37℃溫度下培

養(yǎng)，第二天紀(jì)錄培養(yǎng)液生長(zhǎng)情形。

b. 取接種環(huán)至菌液中，依劃線法將菌液涂抹在 LB 平碟培養(yǎng)基上，分別置放

4℃、25℃、37℃及 50℃生長(zhǎng)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天紀(jì)錄培養(yǎng)液生長(zhǎng)情形。

c. 重複實(shí)驗(yàn) b 步驟，但將細(xì)菌置放在無(wú)氧培養(yǎng)罐中，于 37℃生長(zhǎng)培養(yǎng)箱中培

養(yǎng)，第二天紀(jì)錄培養(yǎng)液生長(zhǎng)情形。

4. 生長(zhǎng)曲線製作及回歸曲線計(jì)算

a. 取 1 ml 隔夜培養(yǎng)菌液至含 5 ml LB 培養(yǎng)液的 15 ml 試管中，于 0 小時(shí)、1 小

時(shí)、2 小時(shí)、3 小時(shí)及 4 小時(shí)分別取 1 ml 菌液，分別作下面實(shí)驗(yàn)。

b. OD550 測(cè)試

將菌液加入玻璃或塑膠測(cè)管(cuvette 或 cell)中，利用分光光度計(jì)

(spectrophotometer)，以 550 nm 波長(zhǎng)測(cè)定菌液的吸光值，紀(jì)錄 OD550 值

c. 細(xì)菌數(shù)目計(jì)算

將菌液分別以十倍連續(xù)稀釋，也就是 10-1、10-2、10-3、10-4、10-5 倍后，以

下列方式計(jì)算

- 血球計(jì)數(shù)盤(pán)

取 10-4 倍稀釋菌加在血球計(jì)數(shù)盤(pán)上后，蓋上蓋波片后，在顯微鏡下計(jì)算及

紀(jì)錄細(xì)菌數(shù)目。

- 涂抹法

在 0 小時(shí)及 1 小時(shí)，取 5 μ 的 10-4 稀釋菌液涂抹在 LB 平碟培養(yǎng)基上，在
0l

42

2 小時(shí)、3 小時(shí)及 4 小時(shí)，則取 5 μ 的 10-5 稀釋菌液涂抹在 LB 平碟培
0l

養(yǎng)基上，個(gè)培養(yǎng)基在 37℃生長(zhǎng)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天計(jì)算及紀(jì)錄細(xì)菌數(shù)

目。

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