細(xì)菌影響生長的因素測試方法與步驟：

1. 取 2 ml E. coli 菌液到含有 200 ml NB 中溷勻。
2. 取 0.1 ml 溷合液涂抹平板，37℃培養(yǎng)，作為 0 小時的細(xì)菌數(shù)。
3. 溷合液 37 震盪培養(yǎng)，每隔 2 小時取出 0.5 ml ，以無菌水 10 倍
連續(xù)稀釋。直到 24 小時。
4. 將各稀釋液取 0.1 ml 涂抹平板，37 ℃培養(yǎng)。
5. 紀(jì)錄各個時間點的菌落數(shù)(cfu)，以菌落數(shù)對時間做圖。

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溫度

環(huán)境中的微生物生長溫度范圍含蓋-5~80℃，但是每一種微生物都具有其適
合的生長溫度范圍，可生長的最高溫度稱之為最高生長溫度，反之稱為最低生長
溫度，并只有一個最適生長溫度，即此微生物生長速度最大時的溫度。依最柿適
生長溫度的不同又可區(qū)分為嗜高溫菌 (thermophiles)、嗜中溫菌 (mesophiles)、適
低溫菌 (psychrophiles)。

菌種：

大腸桿菌 Escherichia coli

方法與步驟：

1. 連續(xù)稀釋：將 6 支含 4.5 ml NB 試管標(biāo)示 上 10-1、10-2、10-3、 10-4、10-5、
10-6。
2. 取 500 ul E. coli 菌液到標(biāo)示 10-1 的試管中溷勻，再取 100 ul 的溷合液到標(biāo)示
10-2 的試管。
3. 以相同的方法稀釋 10-3、 10-4、10-5、10-6 倍并搖勻。
4. 以 4℃、37℃、或 60℃培養(yǎng) 24hr。
5. 從各管菌液中取 100 ul 到平板培養(yǎng)基 NA 中央。
6. 將 L 形玻棒過火，以 L 形玻棒將菌液均勻涂抹在培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng) 24hr
后觀察記錄。

pH 值

嗜酸菌分佈在酸性礦水、酸性熱泉等地區(qū)，最適生長 pH 值在 3.0~3.5 之間
的環(huán)境中。嗜鹼微生物可在 pH 11~12 的條件下生長，但在中性 pH 條件下卻不
能 生 長 。 例 如 巴 氏 芽 孢 桿 菌 (Bacillus pasturii ) 、 嗜 鹼 芽 孢 桿 菌 (Bacillus
alcalophilus )等細(xì)菌即是如此。在高 pH 的鹼水泉中，曾分離出一種黃桿菌
(Flavobacterium )，它在 pH 11.4 的條件下生長良好。

菌種：

大腸桿菌 Escherichia coli
活菌乳酸菌

方法與步驟：

分別取一 loop 的 E. Coli、 B. subtilis 乳酸菌菌液到 pH 值分別為 3、4.6、7、

1.

9 的 3 ml NB 中溷合均勻。
2. 37℃培養(yǎng) 24 小時
3. 以分光光度計 OD600 測吸光值，并記錄。
吸光值 0.1 表示約有 108/ml 大腸桿菌。

含氧量

微生物行有氧呼吸、無氧呼吸的程度不同，因而對氧氣的需求量不同，又可
分為：
1. 好氧菌 (aerobic)：需要氧氣來維持生長和繁衍。
2. 厭氧菌 (anaerobic)：在無氧的環(huán)境下生存，氧氣對細(xì)菌造成氧化傷害而致死。
3. 兼性厭氧菌 (facultative anaerobes)：在有氧的環(huán)境下生長較好，但無氧的環(huán)境
下也能生存。

菌種：

大腸桿菌 Escherichia Coli
枯草桿菌 Bacillus subtilis
活菌乳酸菌

方法與步驟：

將裝有 10 ml NA 的試管行濕熱滅菌后，置于 50℃水浴鍋直到溫度到達(dá)平
衡。
以接種針取菌液，從 10 ml NA 的試管中央插到試管底部，控制組不行穿刺。
試管瓶口過火上蓋，兩手搓試管使菌液均勻。
試管以水降溫后，37℃培養(yǎng) 24、48 小時觀察并記錄之。

滲透壓

嗜鹽菌通常分佈在曬鹽場、鹽湖、腌製品中以及世界上著名的死海中。嗜鹽
菌能夠在鹽濃度為 15~20%的環(huán)境中生長，有的甚至能在 32%的鹽水中生長。

菌種：

大腸桿菌 Escherichia coli
枯草桿菌 Bacillus subtilis

方法與步驟：

取一 loop 的 E. coli 菌液到 3 ml NB 中溷合均勻。

取一 loop 的 B. subtilis 菌液到 3 ml NB 中溷合均勻。
從各管菌液中取 0.1 ml 到鹽度 0、0.85、1.7、3、10%的平板培養(yǎng)基 NA 中
央。
將 L 形玻棒過火，以 L 形玻棒將菌液均勻涂抹在培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng) 24hr
后觀察記錄。

4.

紫外光的照射

紫外光可分為 UV-A，UV-B 與 UV-C 三種。波長在 253.7 nm 之 UV-C 最具
有殺菌效果，一般被稱為『殺菌光』
。紫外光照射細(xì)菌或病毒，導(dǎo)致細(xì)菌或病毒
之 DNA 或 RNA 產(chǎn)生結(jié)構(gòu)變化，使其喪失複製能力，因而無法繁殖，最終命運(yùn)
就是被消滅。

菌種：

大腸桿菌 Escherichia coli

方法與步驟：

取稀釋 100 倍的 E. Coli 菌液到 5 個平板培養(yǎng)基。
將 L 形玻棒過火，以 L 形玻棒將菌液均勻涂抹在培養(yǎng)基上。
將 4 個平板培養(yǎng)基標(biāo)示上 30 秒、1 分鐘、5 分鐘、以及 10 分鐘。
以鋁薄紙包裹培養(yǎng)基的一半后，進(jìn)行 UV 照射 30 秒、1 分鐘、5 分鐘、10
分鐘、以及光修復(fù) 10 分鐘。
37℃培養(yǎng) 24hr 后觀察記錄。

結(jié)果：

1. 細(xì)菌生長曲線圖

以時間對 cfu 作圖，以時間為橫軸，cfu 為縱軸，菌液進(jìn)入 log phase 后的各

點應(yīng)落在一直線上，連續(xù)測量至三個以上的測量值成一直線，利用此直線找出細(xì)

菌生長的加倍時間(doubling time)與平均生長速率(mean growth rate constant)。

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