自動(dòng)放射線(xiàn)顯影術(shù)
材料
準(zhǔn)備下列的設(shè)備及材料:
a. 浸在水中黏有經(jīng)脫臘后的組織切片(組織經(jīng)切片后黏貼于載玻片, 經(jīng)脫臘及水化后浸于裝水的染缸中備用)。
b. 45℃的水浴鍋。
c. 裝置有柯達(dá)2號(hào)濾光片的暗室安全燈。
d. 兩個(gè)小燒杯和一個(gè)浸涂用玻璃杯(杯口約3.5公分,杯高約7公分)。
e. 干燥載玻片用的玻片架。
f. 紙巾。
g. 藥勺子。
h. 柯達(dá)NTB-3底片感光乳劑或Ilford底片感光乳劑。玻片涂裝感光乳劑
a. 在暗房里安裝水浴鍋、干燥載玻片用的架子等。
b. 關(guān)掉電燈,打開(kāi)暗室安全燈,在小燒杯中裝滿(mǎn)3/4的感光乳劑再將小燒杯放在水浴鍋里,感光乳劑將在約10-20分鐘融化。成牛乳狀。
c. 感光乳劑融化之后,將它倒入浸涂玻璃杯(dipping vial),倒?jié)M約3/4杯高(約4公分深),然后在水浴中將它放進(jìn)第二個(gè)燒杯。
使浸涂玻璃杯穩(wěn)定在水浴中間接加熱。
d. 將載玻片從浸泡的二次蒸餾水中移出,再將載玻片斜放在紙巾上以便將它弄干。
e. 每次一片,將載玻片未黏貼標(biāo)簽之一端浸入裝著感光乳劑的浸涂玻璃杯中一下,浸入的深度約4公分。
浸涂后之玻片在玻璃杯邊緣短暫斜置以便去除過(guò)量的感光乳劑,然后將浸涂過(guò)的載玻片倒過(guò)來(lái)插進(jìn)玻片干燥架中。
f. 讓載玻片風(fēng)干約2小時(shí)-小心!它們不能曝光,將“暗室使用中請(qǐng)勿入內(nèi)”標(biāo)語(yǔ)貼在門(mén)上。
g. 把載玻片放在20片裝的黑色玻片儲(chǔ)存盒內(nèi),角落放置一小包干燥劑,在載玻片盒外四周用黑色膠帶纏繞和鋁箔包住以避光。
貼上標(biāo)簽寫(xiě)上你(妳)的名字、試驗(yàn)批號(hào)和日期。
h. 浸泡2片額外的載玻片且貼上標(biāo)簽寫(xiě)上“測(cè)試載玻片”。
i. 把整盒玻片放在4℃下一星期,以使感光劑接受放射線(xiàn)源之曝光。
j. 在黑暗中取出一片測(cè)試的載玻片進(jìn)行如底片沖洗一樣的步驟。(例如,D-19顯影劑以水(1:3)稀釋?zhuān)?分鐘;停止顯影液2分鐘;
固定液5分鐘;水沖洗10分鐘)
k. 將載玻片放在0.1%甲苯胺藍(lán)溶液(Toludine blue)中染色約一分鐘。以水沖洗載玻片直到感光乳劑上的甲苯胺藍(lán)染劑被去除。根部組織應(yīng)呈暗藍(lán)色。 若為壓平標(biāo)本或細(xì)胞抹片則無(wú)必要用甲苯胺藍(lán)染色。
l. 將載玻片進(jìn)行脫水并以蓋玻片封片。
m. 體視
生物顯微鏡檢視玻片標(biāo)本中的細(xì)胞核是否有銀的黑色粒子出現(xiàn)。若曝光時(shí)間足夠則會(huì)有為數(shù)甚多的銀粒子沈淀。此時(shí)即可將所余經(jīng)曝過(guò)光的玻片全部顯影沖洗。
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