標(biāo)題：食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室檢測-微生物鑒定顯微鏡
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2017-8-14 23:37:35
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正文:
對(duì)許多食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室而言，這些檢測方法要求的技術(shù)較
復(fù)雜。除此之外，還有兩個(gè)問題需要解決:一個(gè)是PCR反應(yīng)的抑制劑
;另一個(gè)是如何區(qū)分活細(xì)胞與死細(xì)胞。食品中存在很多酶、蛋白質(zhì)
和其他化合物，它們可能干擾PCR反應(yīng)從而導(dǎo)致假陰性結(jié)果。這些
抑制劑必須被清除或稀釋。既然PCR反應(yīng)能擴(kuò)增目標(biāo)DNA，那么來自
死細(xì)胞的DNA也可以被擴(kuò)增，因此含有沙門菌死細(xì)胞的食品也能檢
出沙門菌陽性結(jié)果。在這種情況下，烹飪過的但仍然含有沙門菌死
細(xì)胞DNA的食物就沒有必要因?yàn)殛栃缘腜CR檢測結(jié)果而被銷毀。一旦
所有這些問題得以解決，PCR技術(shù)可以成為食品中微生物檢測的一
種非常有效的手段，如此，分析人員就能在常規(guī)食品分析中采用該
技術(shù)。
上述遺傳檢測方法可用于檢測食品和其他樣品中的目標(biāo)病原菌
，但不能將微生物鑒定到種或亞種水平，而這種鑒定結(jié)果在突發(fā)的
流行病學(xué)研究和常規(guī)的環(huán)境微生物檢測中是非常重要的。下面重點(diǎn)
討論細(xì)菌的遺傳分類學(xué)進(jìn)展。
RiboPrinter微生物鑒定系統(tǒng)(DuPont Qualicon, Wilmington,
DE)可以自動(dòng)地將微生物鑒定到屬、種、亞種的水平。為了得到一
個(gè)微生物的RiboPrint分析結(jié)果，需進(jìn)行如下步驟。
(1)使用無菌塑料棒從瓊脂平板上挑取可疑目標(biāo)微生物(如沙門
菌)的單菌落。
(2)通過機(jī)械攪拌使塑料棒上的細(xì)胞重懸于緩沖溶液中。
(3)取出一份細(xì)胞懸液加人載樣臺(tái)，將其放置于儀器中。每個(gè)
載樣臺(tái)可同時(shí)容納8個(gè)菌落樣品。
(4)儀器使用裂解液和限制性內(nèi)切酶裂解細(xì)胞，釋放細(xì)胞內(nèi)容
物并切斷DNA分子。DNA片段通過凝膠電泳分離成若千條帶。接著，
DNA探針與目標(biāo)DNA片段雜交，雜交片段產(chǎn)生的熒光被拍攝下來。該
數(shù)據(jù)保存后會(huì)與已知微生物樣品的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較。對(duì)于8個(gè)樣品的
處理過程約需8h。但實(shí)驗(yàn)結(jié)束2h后，即可對(duì)新一輪的8個(gè)樣品進(jìn)行
分析。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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