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標(biāo)題:顯微鏡鏡檢根尖抹片技術(shù)制作步驟

信息分類:站內(nèi)新聞   作者:yiyi發(fā)布   時(shí)間:2011-12-4 20:05:11 將本頁加入收藏

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正文:

顯微鏡鏡檢根尖抹片技術(shù)制作步驟
1. 取健康茁壯的根尖1公分以固定液固定(醋酸-95%酒精1:3溶液)15分鐘-24小時(shí)。
2. 在95%的酒精中清洗,更換酒精數(shù)次。
3. 儲(chǔ)存于70%的酒精中(若需要的話)。
4. 水化,70%、50%、30%的酒精,水,每一步驟五分鐘。
5. 室溫下放入濃度1 N的HCl中1-2分鐘。
6. 輕輕倒出冷的并加入60℃濃度1 N的HCl,此步驟需快速完成,之后將玻璃瓶放入60℃的烘箱或水浴中6-10分鐘。
7. 輕輕倒出熱的HCl并換用1 N的冷HCl處理1分鐘。
8. 輕輕倒出HCl并以蒸餾水漂洗,更換數(shù)次蒸餾水。
9. 加入Schiff試劑使?jié)M過組織,根部在10-15分鐘內(nèi),開始呈現(xiàn)紫紅色。在黑暗中進(jìn)行3-5小時(shí)。
10. 輕輕倒出Schiff試劑(此時(shí)應(yīng)是無色的),根尖用水漂洗。
11. 將根尖包括根冠和頂端分生組織切下(顏色染最深的區(qū)域)。
12. 取根尖置于載玻片上,蓋上蓋玻片,隨即以拇指壓碎根尖(詳細(xì)步驟請(qǐng)參考下節(jié)”抹片制作”)。
13. 如果你要在染色后超過10-15分鐘再壓碎的話(步驟12),則要用亞硫酸-鹽酸混合溶液而非水進(jìn)行漂白,此步驟可防止全部根段變成紫色。
14. 若進(jìn)行永久切片之制作,可將已壓碎根尖的載玻片立即置于干冰塊上。3分鐘后蓋玻片開始結(jié)霜時(shí)即以刀或針尖將蓋玻片彈開。
15. 將載玻片放入95%的酒精中1分鐘。
16. 將載玻片放入純酒精中2次,每次2分鐘。
17. 將載玻片放入二甲苯2次,每次2分鐘。
18. 以膠封片。

抹片技術(shù)
1. 在載玻片上用微量的水漂洗根部組織。
2. 將根部的尖端染色最深處切下并把未染色部份丟棄。
3. 將根尖撕成小片段。
4. 將蓋玻片蓋在材料上,在載玻片下墊紙巾然后再放在堅(jiān)硬的桌面上,用新的橡皮擦輕敲蓋玻片。
5. 當(dāng)細(xì)胞被壓散之后,蓋上軟紙巾(衛(wèi)生紙亦可),再以大拇指或手掌底部壓蓋玻片。
6. 快速地進(jìn)行顯微鏡鏡檢,若該玻片值得保留;再繼續(xù)進(jìn)行永久切片制作。











出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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