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正文:

動(dòng)物組織培養(yǎng)倒置式生物顯微鏡查看細(xì)胞狀況

在做白血球染色體時(shí)已大致介紹過(guò)：

1.MEM動(dòng)物組織培養(yǎng)液的配製：依廠商說(shuō)明之濃度, 將可高溫高壓消毒的MEM加入應(yīng)有總量90﹪的dH2O, 然后高溫高壓消毒, 待冷卻后加入10﹪牛血清, 及最終濃度2×10-3mM的L-glutamine. (若係維持液, 牛血清量可酌減).

2.Animal cell lines可向新竹食科所採(cǎi)購(gòu).

3.CO2培養(yǎng)箱內(nèi)底層應(yīng)加水內(nèi)置少量CuSO4防霉, 保濕.

4.經(jīng)常以倒置式生物顯微鏡查看細(xì)胞狀況.

5.當(dāng)細(xì)胞擁擠, 吸除培養(yǎng)液, 以生理食鹽水洗細(xì)胞2次, (以25cm2培養(yǎng)皿言)加入1ml的0.25﹪trypsin-EDTA液, 使勻佈15sec, 吸除, 再等1min, 加入2ml培養(yǎng)液將細(xì)胞溶入, 然后吸除2/3, 保留1/3, 再加入4.3ml培養(yǎng)液, 即可.

6.對(duì)動(dòng)物細(xì)胞的保存, 可將細(xì)胞以trypsin-EDTA液取出, 離心3,000rpm, 5min, 倒去上清, 以適量生理食鹽水洗細(xì)胞1次(離心洗), 將細(xì)胞以最終濃度2×107/ml溶于含8﹪DMSO的培養(yǎng)液中,保存于小型膠管中,置4℃, 1hr, 0℃, 1hr, -20℃, 1hr, 再置-70℃, 保存.