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標(biāo)題:細(xì)胞的冷凍與解凍?購買一臺細(xì)胞觀察的顯微鏡!哪家最好?

信息分類:站內(nèi)新聞   作者:yiyi發(fā)布   時間:2012-5-9 17:00:00 將本頁加入收藏

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正文:

細(xì)胞的冷凍與解凍
在細(xì)胞冷凍方面,將長滿在 T75 flask 中細(xì)胞用 trypsin-EDTA 打散成單細(xì)胞
懸浮液,以 1500 rpm 離心 5 分鐘,倒掉上清液,加入預(yù)先配置好的冷凍保存液,
混合均勻后,以 1.0 ml 分裝于冷凍保存管中,放置于-4℃, 15~30 分鐘,再移至
-20℃, 15~30 分鐘, 然后放在-80℃, 16~18 小時,最后保存在液態(tài)氮保存筒中備
用。
在細(xì)胞解凍方面,迅速取出放置于液態(tài)氮保存筒中的細(xì)胞冷凍保存管,然
后在 37℃ 水浴中來回震盪,使之快速解凍,解凍后取出放置在含有 10 ml RPMI
1640 培養(yǎng)液的 T75 flask 中,最后放置在 37℃ 5% CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3. Vaccinia virus 病毒株之增殖
將 BHK-21 細(xì)胞培養(yǎng)于含有 10 ml 上述培養(yǎng)液之 T75 flask 培養(yǎng)瓶中至長滿
底面積的 60%時,以 vaccinia virus M.O.I = 0.1 去感染 BHK 21 細(xì)胞,之后放置
于 37℃ 5% CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 18~20 小時,然后取出部份上清液,以病毒斑形
成試驗測定病毒效價










出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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