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正文:
免疫熒光法將熒光素與特異性抗體球蛋白用化學(xué)方法結(jié)合起來,但
不影響特異性蛋白質(zhì)的免疫特性,制備成熒光抗體。當(dāng)熒光抗體與
相應(yīng)抗原(直接法)或抗原一抗體復(fù)合物(間接法)相結(jié)合時,即形成
免疫熒光復(fù)合物,可用
熒光顯微鏡觀察反應(yīng)結(jié)果,若顯示亮綠色熒光,
即表示存在有相應(yīng)的抗原或抗原一抗體復(fù)合物。目前最常用熒
光素為異硫氰酸熒光黃和羅達(dá)明。檢測抗體可用間接免疫熒光法。
間接法是將抗原與未標(biāo)記的特異性抗體(如患者血清)結(jié)合,然后再
使之與熒光標(biāo)記的抗免疫球蛋白抗體(抗抗體)結(jié)合,三者的復(fù)合物
可發(fā)出熒光。本法的優(yōu)點是制備一種熒光標(biāo)記的抗體,可以用于多
種抗原、抗體系統(tǒng)的檢查,即可用以測定抗原,也可用來測定抗體
注意事項
(1)在進(jìn)行免疫熒光抗體試驗時,要注意充分洗滌以避免非特異性
熒光。
(2)經(jīng)免疫熒光抗體試驗后,應(yīng)及時在熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。如
不能及時觀察應(yīng)注意避光保存,以免熒光消退影響結(jié)果。
免疫熒光技術(shù)具有快迅、敏感、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點,但其不足之處
是熒光易消退,難以得到永久性標(biāo)本,非特異熒光干擾較多,結(jié)果
判斷的客觀性差,需高精密的熒光顯微鏡設(shè)備等,使其應(yīng)用受到一
定限制。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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