標(biāo)題：蔗糖梯度溶液線粒體實(shí)驗(yàn)科研型光學(xué)顯微鏡常識(shí)
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作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2016-11-12 23:57:36
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正文:
蔗糖梯度溶液線粒體實(shí)驗(yàn)科研型光學(xué)顯微鏡常識(shí)
線粒體
大鼠肝臟和牛心臟是用于呼吸研究的線粒體的常用來源。在這
些研究中，細(xì)胞器的產(chǎn)量并不是主要考慮的，取而代之的是方法本
身要求盡可能得快速和溫和。使用良好的介質(zhì)和僅3000g離心力來
制備“重組分”線粒體就符合以上要求。密度梯度離心可以實(shí)現(xiàn)從
“重+輕線粒體”組分中更完整地回收線粒體。由于蔗糖梯度溶液
具有高摩爾滲透壓濃度，線粒體、溶酶體和過氧化物酶體的密度范
圍有相當(dāng)大部分的重疊。Percolr和Nycodenz以及碘克沙醇的等滲
梯度溶液提供了更優(yōu)越的分辨率。Nycodenz中線粒體的密度比碘克
沙醇稍高一點(diǎn)，因此提高了它們與較輕的溶酶體的分辨率。由于酵
母線粒體目前廣泛用于許多功能和結(jié)構(gòu)研究之中，實(shí)驗(yàn)方案4．9描
述了廣泛應(yīng)用的這些線粒體在Ny—codenz@梯度溶液中的純化過程
。在底部上樣的不連續(xù)梯度溶液中漂浮分離通常會(huì)提高分辨率，這
種方法現(xiàn)在已應(yīng)用于酵母線粒體分離。然而，觀察哺乳動(dòng)物線粒體
發(fā)現(xiàn)，將粗制的線粒體組分放于梯度溶液底部時(shí)，高流體靜壓會(huì)導(dǎo)
致線粒體結(jié)構(gòu)的部分破裂
也可參看實(shí)驗(yàn)方案，該方案描述了用于從輕線粒
體組分中純化所有主要細(xì)胞器的梯度溶液。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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