標(biāo)題：動植物昆蟲細(xì)胞研究用教學(xué)生物圖像顯微鏡
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時間:2016-12-24 0:35:05
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正文:
在昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)中，只有NOV是具有感染性的，多聚常春藤素
基因不是必需的。多聚常春藤素基因的啟動子是已知最強(qiáng)的動物細(xì)
胞啟動子，并在感染周期的晚期表達(dá)。將多聚常春藤素的結(jié)構(gòu)基因
用目標(biāo)蛋白來替代，就可以進(jìn)行目標(biāo)蛋白的高水平生產(chǎn)(高至占細(xì)
胞蛋白的50％)。分泌性蛋白和糖基化蛋白的生產(chǎn)水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于非
分泌性蛋白。
除了高表達(dá)水平之外，昆蟲細(xì)胞／桿狀病毒系統(tǒng)通常比哺乳動
物細(xì)胞一逆轉(zhuǎn)錄病毒系統(tǒng)具有更高的安全性。來自于卵巢或晶胚昆
蟲細(xì)胞系是連續(xù)的，但不會發(fā)生轉(zhuǎn)化。對于動植物，桿狀病毒是非
病原性的。因此昆蟲細(xì)胞一桿狀病毒系統(tǒng)就具有潛在的安全優(yōu)勢。
另一個重要的優(yōu)點(diǎn)是分子生物學(xué)方面的優(yōu)勢，以及不到1個月就能
完成正確折疊的蛋白質(zhì)的高水平表達(dá)。
就像giO孚L動物細(xì)胞一樣，這個系統(tǒng)也具有能夠進(jìn)行幾乎所有
復(fù)雜翻譯后修飾的細(xì)胞器。但是，即使存在這樣的細(xì)胞器，至少有
部分在昆蟲細(xì)胞一桿狀病毒系統(tǒng)中生產(chǎn)的蛋白質(zhì)并沒有加工成和天
然蛋白質(zhì)完全一樣。在某些情況下，這種輕微的改變可能是有益的
(例如：在艾滋病疫苗的開發(fā)中增強(qiáng)了抗原反應(yīng))，但在另一些情況
下可能是無益的。當(dāng)加工成復(fù)雜糖基化形式(包括唾液酸)時，通常
發(fā)現(xiàn)只存在簡單的糖基化形式。復(fù)雜形式產(chǎn)品的生產(chǎn)需要特殊的宿
主細(xì)胞系，并對培養(yǎng)條件非常敏感。
昆蟲細(xì)胞一桿狀病毒系統(tǒng)是一種展示異源蛋白質(zhì)生產(chǎn)整體前景
的良好系統(tǒng)。任何蛋白質(zhì)生產(chǎn)的生物過程都是很復(fù)雜的，包括許多
亞組分的非線性相互作用。因此優(yōu)化的過程并不僅僅是單個優(yōu)化步
驟的總和。一個因素是感染病毒顆粒與細(xì)胞的比率(例如，感染復(fù)
數(shù)或MOI)，它會改變感染的同步性和所產(chǎn)生蛋白質(zhì)的表達(dá)動力學(xué)。
另一個因素是病毒的基因設(shè)計(jì)(和載體設(shè)計(jì)的許多特點(diǎn)相似)。病毒
庫的質(zhì)量也很重要。如果沒有正確維護(hù)病毒庫，就有可能形成突變
病毒。一個例子是缺損干擾病毒顆粒(DIP)的形成，當(dāng)使用高M(jìn)OI值
時，DIP使培養(yǎng)基中蛋白質(zhì)的表達(dá)減少90％。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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