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正文:
實驗預(yù)習(xí):實驗是從動物的器官中分離細胞,將細胞染色于
顯微鏡下觀察。
三、實驗?zāi)康模豪肞ES將精子沖洗下來之后,于顯微鏡下觀察其型態(tài)。
四、實驗原理:
1. 精子細胞為一個擁有半套染色體且具有泳動能力的體內(nèi)細胞。精子于睪丸中形成之后,會進行所謂的泳動特性,此時它僅能移至儲存的位置副睪丸處。
2. 在成功受精過程中,精子們必須繼續(xù)往前游動,當(dāng)精子進入女性生殖道頸口時,精子的游動速率會變的愈來愈慢。精子們能藉由排卵作用而重新獲得泳動的能力,以便能達到輸卵管的上部位置并進行與卵的受精作用。
3. 目前有多位科學(xué)家從事環(huán)境賀爾蒙、藥物及精子本身離子管道的研究,精子泳動能力的針測是不可或缺的一個基本實驗。
五、實驗步驟:
將雞睪丸以RO水清洗表面,去除不必要的污水
以剪刀將雞睪丸剪開,置于10公分組織培養(yǎng)皿上
以PBS來回沖洗剖面處,以利于精子的泳出
吸取含有精子的PBS溶液,以濾紙過濾
置于玻片上染色后觀察
六、實驗結(jié)果:
本次觀察精睪丸中的精細胞主要有三種染色方式,分別為trypan blue染色法,;再者為以Liu’s stain染精細胞;最后為以Giemsa stain染精細胞。在trypan blue染色中可以看到精子游動的情形。
七、結(jié)果討論:
在精細胞經(jīng)過trypan blue的結(jié)果當(dāng)中,藍色的為死掉的精細胞,亮白色的為活的精細胞。在剛開始的顯微鏡觀察中可以看到游動的精細胞,且可以看到完整的鞭毛構(gòu)造。
在圖三及圖四精細胞經(jīng)過Liu’s stain的結(jié)果中,可以看到藍紫色的核酸及鞭毛構(gòu)造。因為細胞經(jīng)過高速離心的動作,所以精細胞都已經(jīng)死亡,而且可以看到鞭毛已經(jīng)脫離了精細胞,但由圗中仍可以看到完整具有鞭毛的精細胞。
圗五及圖六為精細胞經(jīng)過Giemsa stain染色后的結(jié)果圖。本次實驗第一次用到Giemsa stain,細胞經(jīng)過顯微鏡觀察后可以看到細胞呈灰白色。由于Giemsa stain不需要將細胞離心處理,所以也可以看到很多完整具有鞭毛的精細胞。
八、實驗心得:
這是我們第一次利用動物的器官進行實驗,并以染色的方式觀察其結(jié)果。在剛開始的玻片觀察中可以看到精細胞游動的樣子,但是之后因為細胞處理的時間過長,精細胞大部分都已經(jīng)失去其活性,所以在顯微鏡下看到的精細胞大部分都已經(jīng)不會動。我覺得這對我們而言是一個很難得有趣的經(jīng)驗。
出自http://www.xianweijing.org
金相顯微鏡百科
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