標(biāo)題：顯微鏡熒光光度計量的原理-主要的優(yōu)點有哪些
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時間:2014-5-5 15:42:15
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正文:
顯微鏡熒光光度術(shù)(microfluorophotometry)又稱細(xì)胞熒光光度術(shù)(cyto
f luorophotometry)或定量熒光顯微術(shù)(quantitative fluorescence micro
scopy)。顯微鏡熒光光度是在光學(xué)顯微鏡的分辨水平上進行熒光的定量和定
性分析。它的主要優(yōu)點是:在顯微鏡下測定低濃度的反應(yīng)產(chǎn)物，靈敏度比吸
收法高104次方。由于熒光物質(zhì)本身就是發(fā)射的光源，因此在測定不均一分
布的發(fā)色團時，不存在分布誤差的問題，所以測定方法簡單;但由于存在熒
光消褪和熒光碎滅問題，測量也存在些特殊問題。
1.測定細(xì)胞內(nèi)化學(xué)成分的含量:用熒光定量DNA, RNA、組蛋白、總蛋白
、精氨酸、賴氨酸、糖元和疏基，主要是利用特定的熒光染料與被測定物質(zhì)
進行特異性的結(jié)合，并在一定的濃度范圍內(nèi)呈化學(xué)計量學(xué)關(guān)系，從而可根據(jù)
熒光強度來測定物質(zhì)的含量，
2.免疫熒光的定最測定:視覺半定盤的方法只有在熒光強度相差2倍時，
才能判斷出來，而利用細(xì)胞熒光光度計則能測出細(xì)微的熒光變化。
4.酶的動力學(xué)研究:細(xì)胞熒光光度術(shù)特別適用于活細(xì)胞或沒有固定的組
織切片酶的動力學(xué)研究，例如通過測定還原型輔酶I結(jié)合到蛋白質(zhì)的熒光變
化來分析氧化酶體系的變化。
5.微體積的顯微熒光光度測定:免疫化學(xué)和酶化學(xué)研究常需要測定包含
在微滴、微毛細(xì)管或人工基質(zhì)微球中微小體積的熒光反應(yīng)產(chǎn)物。細(xì)胞熒光光
度計能準(zhǔn)確的測定直徑為1-50微米大小“微池”中的熒光。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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